한천판

Agar plate
한천판
사용하다미생물 배양
예체능
관련 항목페트리 접시
배지
한천판 오염

한천판은 미생물을 배양하기 위해 한천과 고화된 배지를 함유한 페트리 접시이다.때때로 항생제와 [1]같은 선택적 화합물이 성장에 영향을 미치기 위해 첨가된다.

효모세포, 곰팡이세포 또는 세균세포를 이용한 스폿아세이(spot assay)에 사용되는 96개의 핀너

접시에 놓인 개별 미생물은 개별 군체로 자랄 것이며, 각각의 복제는 개별 조상 유기체와 유전적으로 동일할 것이다(낮고 피할 수 없는 돌연변이율을 제외).따라서 플레이트는 콜로니 카운터를 사용하여 액체 배양물의 농도를 추정하거나 해당 배양물의 적절한 희석 또는 유전자적으로 다른 유기체의 혼합 배양물로부터 유전적으로 순수한 배양물을 생성하는데 사용할 수 있다.

세포를 플레이팅하기 위한 몇 가지 방법이 있습니다.한 가지 기술은 "스트라이킹"으로 알려져 있습니다.이 기술에서, 때로는 접종기로 알려진 얇은 무균 와이어 끝에 있는 배양액 한 방울이 한천 표면에 줄무늬를 만들어 유기체를 남깁니다. 줄무늬의 시작 부분에서 더 많은 수가, 끝에 더 적은 수가 남습니다.성공적인 "스트릭" 동안, 퇴적된 유기체의 수는 다른 멸균 고리를 사용하여 추가 배양하기 위해 제거될 수 있는 그 지역에서 구별되는 개별 군집들이 자라게 될 것입니다.

한천판 위에 생물을 도금하는 또 다른 방법은 스폿 분석입니다.이러한 유형의 분석은 세포의 생존 가능성을 확인하는 데 자주 사용되며 핀너(종종 프로거라고도 함)를 사용하여 수행됩니다.세 번째로 사용되는 기술은 세포를 플레이팅하기 위해 멸균 유리구슬을 사용하는 것입니다.본 발명에 따르면 세포는 한천판에 소량의 피펫을 주입한 액체 배양액에서 성장한 후 비즈와 함께 확산된다.레플리카 도금도 한천 판에 세포를 판으로 만드는 또 다른 기술이다.이 네 가지 기술이 가장 일반적이지만 다른 기술도 가능합니다.한천 [1]플레이트의 오염을 방지하기 위해서는 멸균 방식으로 작업하는 것이 중요합니다.따라서 도금은 종종 층류 캐비닛이나 분젠 [2]버너 옆의 작업대 위에서 이루어집니다.

역사

1881년 로베르트 코흐의 연구실에서 남편 발터 헤세의 기술자로 일하던 파니 헤세는 한동안 [3]잼 제조에서 흔히 볼 수 있었던 한천을 효과적인 세팅제로 제안했다.

종류들

전자 콜로니 카운터에서 볼 수 있는 한천 플레이트
대장균 군락의 한천 배양

다른 배지와 마찬가지로, 접시에 사용되는 한천의 배지는 "정의" 또는 "정의되지 않음"으로 분류될 수 있다. 정의된 배지는 유기체가 필요로 하는 개별 화학 물질로부터 합성되어 정확한 분자 조성을 알 수 있는 반면, 정의되지 않은 배지는 효모 추출물과 같은 천연 생성물로 만들어지며, 정확한 조성은 효모 추출물과 같은 천연물로 만들어진다.OS를 알 [4]수 없습니다.

한천판은 존재하는 유기체의 성장을 허용하기 위한 목적으로 허용되거나, 이러한 [5]유기체의 특정 부분집합만 성장을 허용하기 위한 목적으로 제한적이거나 선택적인 것으로 제조될 수 있다.예를 들어, 유당과 같은 특정 화합물을 유일한 탄소 공급원으로서 제공하고, 따라서 해당 화합물을 대사할 수 있는 유기체만을 선택하거나, 특정 항생제 또는 다른 물질을 포함하여 해당 물질에 내성이 있는 유기체만을 선택함으로써 영양 요구 사항의 형태를 취할 수 있다.이것은 정의되고 정의되지 않은 매체와 어느 정도 관련이 있습니다; 정의되지 않은 매체는, 천연물로 만들어지고 매우 많은 유기 분자의 알려지지 않은 조합을 포함하고, 일반적으로 더 다양한 유기체의 요구를 제공하는 것에 있어 더 관대합니다, 반면 정의된 매체는 특정한 유기체를 선택하기 위해 정밀하게 조정될 수 있습니다.fic 속성.

한천판은 또한 생육에 따라 유기체가 선택되는 지표판일 수 있으며, 대신 일부 군집의 색 변화에 의해 구별된다. 일반적으로 배지에 [6]첨가된 일부 화합물에 효소의 작용에 의해 발생한다.

플레이트는 수행되는 테스트에 따라 최대 12시간 동안 배양됩니다.

일반적으로 사용되는 한천 플레이트 유형은 다음과 같습니다.

한천판 위의 적혈구는 감염을 진단하는데 사용된다.왼쪽은 양성 포도상구균 감염이고 오른쪽은 양성 연쇄상구균 배양입니다.

혈액 한천

Streptoccus spp. (왼쪽) α 용혈(S. mitis), (중앙) β 용혈(S. pyogenes), (오른쪽) β 용혈(= 비용혈, S. salivarius)

혈액 한천판

혈액 한천판(BAPs)에는 포유류의 혈액(일반적으로 양이나 말)이 포함되어 있으며, 일반적으로 농도가 5~10%입니다.BAP는 까다로운 유기체를 격리하고 용혈 활성을 검출하는 데 사용되는 농축된 차등 매체입니다.β-용혈 활성은 군락을 둘러싼 적혈구 함량의 용융과 완전한 소화를 보일 것이다.예로는 용혈성 연쇄상구균이 있다.α-용혈은 적혈구의 부분 용해만 유발하며(세포막은 그대로 유지됨), 헤모글로빈이 메트헤모글로빈으로 전환되기 때문에 녹색 또는 갈색으로 나타납니다.이것의 예로는 연쇄상구균 바이러스단이 있다.γ-용혈(또는 비용혈)은 용혈 [7]활성의 부족을 말한다.BAPs는 또한 고기 추출물, 트립톤, 염화나트륨, 그리고 한천을 함유하고 있다.

초콜릿 한천

초콜릿 한천은 혈액을 80°C로 가열하여 용해시킨 혈액 한천판의 일종이다.헤모필루스 인플루엔자균과 같은 까다로운 호흡기 세균을 키우는 데 사용된다.초콜릿 한천은 색깔 때문에 이름이 붙여졌고, 접시에는 초콜릿이 실제로 들어 있지 않다.

말혈 한천

말혈 한천은 혈액이 풍부한 미생물 배양 배지의 일종이다.그것이 풍부해짐에 따라, 그것은 특정한 까다로운 세균의 성장을 가능하게 하고, 이러한 세균 배양에서의 용혈 활성의 표시를 가능하게 한다.

테이어-마르틴 한천

테이어 마르틴 한천은 Neisseria gonorhoae를 분리하기 위해 설계된 초콜릿 한천이다.

티오황산시트르산담즙염수크로스한천

티오황산구연산담즙염 수크로스 한천은 Vibrio [8]cholerae를 포함한 Vibrio spp.의 성장을 촉진한다.

일반세균배지

세균대사에 따른 증식을 나타내는 4종류의 한천판
  • 담즙 에스쿨린 한천은 장구균과 D군 스트렙토코쿠스의 분리에 사용된다.
  • CLED 한천 – 시스테인, 유당, 전해질 결핍 한천은 프로테우스 종의 무리를 억제하고 유당 발효제와 비발효제를 구분할 수 있기 때문에 요로 박테리아를 분리 및 분화하는 데 사용됩니다.
  • 그래나다 배지는 B군 스트렙토코커스, 스트렙토코커스 아갈락티아를 임상 샘플에서 분리 및 구별하는 데 사용됩니다.붉은 군락을 형성하면서 그라나다 배지에서 자라며, 이에 수반되는 대부분의 박테리아가 억제된다.
  • 헥토엔 장내 한천은 장내세균과의 분변세균을 분리하여 회수하는 것을 목적으로 하고 있습니다.살모넬라균과 시겔라를 분리하는 데 특히 유용하다.
  • 리소게니 수프
  • 맥콩키 한천은 그램 양성균의 증식을 억제하면서 그램 음성균을 구별하기 위해 사용되는 선택적 미분배지입니다.한천에 담즙염과 크리스털 바이올렛을 첨가하면 대부분의 그램 양성 박테리아가 번식하지 못해 맥콘키 한천을 선택적으로 만들 수 있습니다.유당과 중성 적색은 분홍색 집락을 형성하는 유당 발효제와 명확한 집락을 형성하는 유당 비발효제를 구별하기 위해 첨가된다.대체 매질인 에오신 메틸렌 블루도 비슷한 용도로 사용됩니다.
  • Mannitol salt agar 또한 선택적이고 차동적인 배지입니다.만니톨은 만니톨을 발효시키는 유기체를 나타냅니다: 만니톨 발효는 젖산을 생산하여 pH를 낮추고 접시를 노란색으로 바꿉니다.소금은 할로파일을 위한 것이다; 높은 염분 함량을 견디지 못하는 유기체는 잘 자랄 수 없다.
  • 뮐러-힌튼 한천은 쇠고기 주입, 펩톤 및 전분을 함유하고 있으며 주로 항생제 감수성 시험에 사용된다.그것은 혈액 한천 형태일 수 있다.
균류(자낭균)는 비선균 배양에서 자라며, 각각은 하나의 선택된 유기체의 배양으로 다른 유기체가 없으며, 고립된 배양 유기체의 연구를 가능하게 한다.
감자 덱스트로스 한천에서 자라는 아스페르길루스 니제르
  • 영양 한천은 보통 비침해성 생물의 성장과 색소 생성 관찰에 사용된다.학교 과학 실험실에서 사용하는 것은 병원균을 선별적으로 키우지 않기 때문에 안전하다.
  • önEnöz 한천은 살모넬라균과 시겔라균 군락을 다른 엔테로박테리아과와 분명하고 확실하게 구분할 수 있기 때문에 보다 신속한 세균학적 진단을 가능하게 한다.이 배지를 사용할 때 얻은 대변 샘플에서 얻은 살모넬라균의 수율은 LEIFSON 한천 또는 살모넬라-Shigella 한천에서 얻은 수율보다 높다.
  • 페닐에틸알코올한천은 그램음성균(예를 들어 대장균, 시겔라, 프로테우스 등)을 억제하면서 포도상구균종을 선택한다.
  • 비특이 배지인 R2A 한천은 물을 모방하기 때문에 물 분석에 사용된다.
  • 트립틱(트립타아제) 콩 한천(TSA)은 콩가루와 카세인의 효소적 소화에 의해 제조되는 범용 배지입니다.이것은 종종 다른 한천 유형의 기본 배지가 됩니다. 예를 들어, 혈액 한천 판은 혈액으로 TSA 판을 농축하여 만들어집니다.TSA 플레이트는 Bruceella, Corynebacterium, Listeria, Neisseria, Vibrio를 포함한 많은 반악성 박테리아의 성장을 지원합니다.
  • Xylose-Lysine-deoxycholate 한천은 대변 샘플 배양에 사용되며 두 가지 지시자를 포함한다.그램 양성균을 억제하는 동시에 그램 음성균의 성장을 촉진하는 것을 목적으로 한다.유당 발효기의 군체는 노란색으로 보인다.또한 식품 샘플에 존재할 수 있는 살모넬라균 배양에도 사용됩니다.대부분의 살모넬라 군락은 검은 중심을 생산한다.
  • 그램 음성균인 Pseudomonas aeruginosa의 선택적 분리에 쎄트리미드 한천을 사용한다.
  • 틴스데일 한천은 테루산칼륨을 함유하고 있어 코리네박테륨 [8]디프테리아를 분리할 수 있다.

균배지

Trichophyton rubrum var. Rodhaini 군락을 가진 Sabouraud 한천 접시 바닥도
  • Sabouraud 한천은 곰팡이 배양에 사용되며 pH가 낮아 대부분의 세균의 성장을 억제한다.또한 그람 음성균의 성장을 억제하는 항생제 겐타마이신을 함유하고 있다.
  • 건초 주입 한천은 (진균류가 아닌) 슬라임 곰팡이의 배양에 특화되어 있습니다.
  • 감자 덱스트로스 한천은 특정 종류의 곰팡이를 배양하는데 사용된다.
  • 맥아 추출물 한천은 펩톤 함량이 높고 산성이다.그것은 본질적으로 곰팡이 미생물의 분리에 사용된다.

모스 미디어

효모배지

  • YEPD 배지는 사카로미세스 세레비시아에나 칸디다 알비칸스 같은 효모의 일반적인 배지로 종종 사용된다.
  • 포자배지는 포자를 형성해야 할 때 사용하는 매체이다.균주가 포자를 형성할 수 있는지 여부에 따라 곰팡이나 박테리아를 다룰 때도 사용할 수 있습니다.

메가 플레이트

  • 하버드대 과학자들이 개발한 해초 유래 한천 배지 14L(리터)로 채워진 2인치×4인치 페트리 플레이트. 대장균이 항생제에 내성을 갖도록 진화한 과정을 확인하기 위해 사용됐다.메가 플레이트는 또한 병렬 진화, 돌연변이 선택, 식민지 간섭 등과 [10]같은 미생물학의 더 독특한 개념을 연구하는 데 도움을 주었다.
YPD 한천에서 효모세포와 필라멘트세포로 자라는 효모 칸디다 알비칸

「 」를 참조해 주세요.

다양한 유형의 한천:

레퍼런스

  1. ^ a b Madigan M, Martinko J, eds. (2005). Brock Biology of Microorganisms (11th ed.). Prentice Hall. ISBN 0-13-144329-1.
  2. ^ Sanders, Erin R. (11 May 2012). "Aseptic Laboratory Techniques: Plating Methods". Journal of Visualized Experiments (63): e3064. doi:10.3791/3064. PMC 4846335. PMID 22617405. Archived from the original on 14 November 2017. Retrieved 3 May 2018.
  3. ^ "History of the agar plate". Laboratory News. Archived from the original on 11 February 2010. Retrieved 2010-02-22.
  4. ^ Baron S; et al., eds. (1996). Baron's Medical Microbiology (4th ed.). University of Texas Medical Branch. ISBN 0-9631172-1-1. (via NCBI Bookshelf).
  5. ^ Ryan KJ; Ray CG, eds. (2004). Sherris Medical Microbiology (4th ed.). McGraw Hill. ISBN 0-8385-8529-9.
  6. ^ "Indicator Plates". Retrieved 12 July 2018.
  7. ^ "Blood Agar Plates and Hemolysis Protocols". Archived from the original on 2012-02-02. Retrieved 2014-10-28.
  8. ^ a b Fisher, Bruce; Harvey, Richard P.; Champe, Pamela C. (2007). Lippincott's Illustrated Reviews: Microbiology (Lippincott's Illustrated Reviews Series). Hagerstwon, MD: Lippincott Williams & Wilkins. ISBN 978-0-7817-8215-9.
  9. ^ Reski, Ralf; Abel, Wolfgang O. (1985). "Induction of budding on chloronemata and caulonemata of the moss, Physcomitrella patens, using isopentenyladenine". Planta. 165 (3): 354–358. doi:10.1007/bf00392232. PMID 24241140. S2CID 11363119.
  10. ^ "A cinematic approach to drug resistance". Harvard Gazette. 2016-09-08. Retrieved 2021-04-08.

외부 링크

Wikibook School Science는 다음과 같은 주제에 대한 페이지를 가지고 있습니다: Agar plate
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