노시케이션 어세이

Nociception assay

노키션 어세이(nociption assay, nocioption assay)는 노키셉터의 자극에 의해 야기되는 통증과 같은 유해한 자극을 검출하는 동물(통상 설치류)의 능력을 평가한다.이 측정들은 금단, 핥기, 움직일 수 없는 행동, 발성 등의 행동을 통해 통증의 존재를 측정한다.통증의 감각은 하나의 개념이 아니기 때문에 연구자는 어떤 노크션 어세이(nocception assay)를 사용할지 의식해야 합니다.

포르말린

포르말린 아세이(Formalin assay)는 가장 인기 있는 노시션 화학 아세이(chemical assay)이다.그것은 쥐의 뒷발톱 표면에 포르말린 희석 용액을 주입한 후, 영향을 받은 뒷발톱의 [1]움찔, 핥기, 물고기와 같은 전형적인 행동의 점수를 얻는 것을 수반한다.초기 또는 급성 단계(주사 직후)는 노카셉터의 직접 활성화를 반영하고, 후기 또는 강장 단계(주사 후 15~20분)는 [1]염증을 반영하여 약 1시간 동안 지속된다.일반적으로 포르말린 분석은 랫드에 사용되지만,[2] 포르말린 농도와 스코어링 방법은 마우스에 맞게 수정될 수 있다.다른 염증성 통증 모델에 비해 포르말린 분석의 주요 이점 중 하나는 [2]반응 지속 시간이 제한적이라는 것이다(약 1시간).또한 앞에서 설명한 바와 같이, 이 검사는 두 개의 개별 단계에서 반응을 나타내므로, 연구자들은 단일 유해 화학 물질을 사용하여 급성 및 강장성 통증을 모두 모델링할 수 있습니다.

와이싱

본 발명은 시험화합물의 말초침투활성을 아세트산 [3][4]복강내주사에 의해 유도되는 복부마찰수로 결정한다.

폰 프레이

Maximilian von Frey가 도입하고 Weinstein이 수정한 Von Frey 분석은 설치류의 기계적 [1]자극에 대한 민감성을 테스트하기 위해 길이 약 50mm의 나일론 막대 작은 조각인 Von Frey 털 또는 섬유를 사용합니다.공정이 정말로 유해한 것인지 단순히 성가신 것인지 불분명하기 때문에 이 분석은 기계적 감각 또는 단순한 기계적 감성의 테스트입니다.이 실험에서, 그 동물은 높은 그물 위에 서고, 그물 사이로 그물코를 통해 그 동물의 뒷발톱을 [2]찌르기 위해 폰 프레이 털을 삽입한다.동물의 정상적인 반응은 발을 움츠리거나 핥거나 흔들거나 가능한 발성을 포함하지만, 이러한 반응은 실험 내에서의 변화에 따라 달라질 수 있습니다.예를 들어 뒷발의 발끝 표면은 일반적으로 배면에 비해 낮은 인출 역치와 관련되어 있으며, 그 두께에 의해 [2]섬유의 정확한 힘이 결정된다.임계값은 보통 연속 테스트 중에 감소하지만 약 3세션 후에는 안정된다는 점도 유의해야 합니다.업다운 또는 브루세논 분석과 같은 알고리즘을 사용하여 범위의 가장 역동적인 부분에 시험을 집중시킬 수 있으며, 후속 곡선 피팅과 매개변수 추정도 유사하게 [5]표준화할 수 있다.또는, 연구자가 금단 반응이 일어날 때 관찰할 수 있도록 한 탐침의 힘을 점차 증가시키는 자동 폰 프레이 시스템이 최근 발견되었다.

열측정

급성 열자극에 대한 민감성은 살아있는 종들의 통증 [2]연구에 사용되는 가장 일반적인 시험이다.유해한 열 자극에 의해 유발되는 행동 반사는 통증 민감도와 다양한 진통제를 통한 감소의 비교적 좋은 예측 변수이다.열분석의 한 가지 중요한 한계는 인간의 [2]고통 모델로서의 동물 결과의 특수성과 유효성에 있다.쥐의 피험자에 있는 침입성 구심소의 기능적 역학에 대해서는 거의 알려져 있지 않기 때문에, 이러한 동물로부터 관찰된 통증 반응의 해석은 의심스럽다.[2]

꼬리 빼기

통증 민감도 [2]테스트에는 일반적으로 두 가지 버전의 꼬리 빼기 검사가 사용됩니다.종래의 복사열 시험에서는, 열원을 꼬리의 작은 면적을 대상으로 해, 꼬리가 열원에서 멀어지는 지연 시간을 계측한다.테일침투시험에서 액체용기는 침습온도(통상 50–55 °C 또는 0 °C 이하)로 가열 또는 냉각된다.그 후 꼬리를 액체에 담근 상태로 동물 실험체를 배치하고, 액체에서 꼬리를 빼내기 위한 대기 시간을 측정합니다.

꼬리 빼기 테스트를 수행할 때 사용하는 동물 피험자는 유해 자극을 유도하는 데 필요한 정확한 위치 때문에 상당히 높은 수준으로 억제해야 합니다.구속은 일반적으로 피험자가 습관화되거나 자발적으로 [2]들어갈 수 있는 작은 플렉시글라스 튜브나 천/카드보드 포켓에 넣어 수행된다.

열판 테스트 또는 하그리브스 테스트와 같은 다른 형태의 열 흡입 테스트에 대한 꼬리 빼기 어세이드의 주요 장점은 반복 관찰을 통한 결과의 상대적 안정성이다.다른 테스트의 통증-반사 지연 시간 관측치는 일반적으로 꼬리 빼기 분석에서 얻은 것보다 피험자 전반과 피험자 내에서 훨씬 더 가변적이다.

핫플레이트

주요 기사:핫플레이트 테스트
쥐를 대상으로 수행된 핫플레이트 분석의 예

자기나 금속과 같은 열전도성 표면은 동물 실험체의 침입 반응을 유도하는 온도(보통 50~56°[2]C)로 가열된다.그런 다음 피사체를 수면 위로 올려놓고 차단물에 의해 플랫폼을 떠나는 것을 방지한다.통증-반사 동작에 대한 지연 시간이 [1]측정됩니다.이 분석의 한 가지 복잡한 점은 반복 테스트에 적합하지 않다는 것입니다.과거 핫플레이트 테스트를 받은 동물은 대기시간이 감소하고 항침해제에 [1]대한 민감도가 감소하는 것이 특징인 행동 내성 현상을 보인다.핫플레이트 테스트의 또 다른 복잡성은 무엇이 행동적인 통증 반응을 구성하는지를 결정하는 것입니다. 발성, 실린더 밖으로 기어 나오려는 시도 [2]등입니다.또한 열 자극을 제어된 방식으로 전달하는 것은 표면적 노출과 동물의 [2]이동 여부에 따라 각 섹션의 온도가 다르기 때문에 어려움을 일으킨다.

테일 플릭

주요 기사:테일 플릭 테스트
테일 플릭 검사를 위한 기존 설정 예제

꼬리 튕김 검사 또는 꼬리 튕김 테스트는 쥐의 꼬리를 겨냥한 고강도 광선을 사용하여 [1]노케이션을 탐지합니다.정상적인 설치류에서는 빛의 빔에 의해 유발되는 유해한 열감각으로 인해 굴곡 제거 [2]반사를 통해 꼬리의 원형적인 움직임이 발생합니다.연구자는 보통 쥐의 성별, 나이, 몸무게에 [1]의해 영향을 받는 요소인 반사가 유도되는 데 걸리는 시간을 측정합니다.테일 플릭 분석의 가장 중요한 매개변수는 빔 강도이며, 일반적으로 3~4초 이상의 지연 시간을 생성하는 자극은 더 다양한 결과를 [6]생성한다.고려해야 할 또 다른 중요한 요소는 사용되는 구속 수준입니다. 너무 꽉 쥐어 있는 설치류는 높아진 스트레스 [6]수준으로 인해 꼬리 튕김 지연 시간이 더 길어질 수 있습니다.

하그리브스

하그리브스 검사는 고통을 유발하기 위해 꼬리가 아닌 뒷발로 향하는 고강도 광선을 사용한다; 그리고 나서 조사자는 그 동물이 뒷발을 [1]빼는 데 걸리는 시간을 측정한다.꼬리 튕김 분석과 달리 설치류는 종종 구속되지 않고 복사 열원은 뒷발톱에 집중된다.Hargreaves 검사의 컷오프 대기 시간은 일반적으로 10초로 [7]설정됩니다.테일 플릭 어세이보다 이 테스트의 주요 장점은 신체의 [2]양쪽에서 치료 효과를 독립적으로 평가할 수 있다는 것입니다.

적용들

노크션 어세이에서 가장 일반적인 적용 중 하나는 새로운 진통제 및 이와 유사한 약물의 효과를 테스트하는 것이다.그런 다음 남성 대 여성 또는 젊은 대 노인과 같은 다양한 모집단에 대한 약물의 효과 차이를 측정하기 위해 비교 테스트를 수행할 수 있다.이 검사들은 또한 비정상적인 노크션 검사 반응을 보일 경우 피험자의 특정 유해한 질병이나 이상을 확인할 수 있다.또한 노크션 테스트를 사용하여 노크션 [8]자체의 유전성을 테스트할 수 있습니다.또한 "고통" 경로의 생리를 평가하기 위해 노케이션 분석을 사용할 수 있다.통증 경로에서 캡사이신 수용체가 하는 역할은 [9]수용체가 있거나 없는 생쥐의 노크션 어세이 결과를 비교함으로써 측정되었다.또한 관리 대상에게 정규 인식 반응이 있는지 확인하기 위해 다른 검정에 유용합니다.

「 」를 참조해 주세요.

레퍼런스

  1. ^ a b c d e f g h Carter, Matt; Shieh, Jennifer C. (2010). "Nociception". Guide to Research Techniques in Neuroscience. Burlington, MA: Academic Press. pp. 51–2. ISBN 978-0-12-374849-2.
  2. ^ a b c d e f g h i j k l m n Mogil, Jeffrey; Wilson, Sonya; Wan, You (2001). "Assessing Nociception in Murine Subjects". Methods in Pain Research. Frontiers in Neuroscience. Vol. 20012652. doi:10.1201/9781420042566-c2. ISBN 978-0-8493-0035-6.
  3. ^ Koster, R.; Anderson, M.; De Beer, J. (1959). "Acetic acid for analgesic screening". Federation Proceedings. 18: 412–417.
  4. ^ Matera, Carlo; Flammini, Lisa; Quadri, Marta; Vivo, Valentina; Ballabeni, Vigilio; Holzgrabe, Ulrike; Mohr, Klaus; De Amici, Marco; Barocelli, Elisabetta; Bertoni, Simona; Dallanoce, Clelia (2014). "Bis(ammonio)alkane-type agonists of muscarinic acetylcholine receptors: Synthesis, in vitro functional characterization, and in vivo evaluation of their analgesic activity". European Journal of Medicinal Chemistry. 75: 222–232. doi:10.1016/j.ejmech.2014.01.032. ISSN 0223-5234. PMID 24534538.
  5. ^ Bradman, Matthew J.G.; Ferrini, Francesco; Salio, Chiara; Merighi, Adalberto (November 2015). "Practical mechanical threshold estimation in rodents using von Frey hairs/Semmes–Weinstein monofilaments: Towards a rational method". Journal of Neuroscience Methods. 255: 92–103. doi:10.1016/j.jneumeth.2015.08.010. PMID 26296284. S2CID 206270382.
  6. ^ a b Bannon, Anthony W.; Malmberg, Annika B. (2007). "Models of Nociception: Hot-Plate, Tail-Flick, and Formalin Tests in Rodents". Models of Nociception: Hot‐Plate, Tail‐Flick, and Formalin Tests in Rodents. Current Protocols in Neuroscience. Vol. Chapter 8. pp. Unit 8.9. doi:10.1002/0471142301.ns0809s41. ISBN 978-0-471-14230-0. PMID 18428666. S2CID 19332207.
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  9. ^ Caterina, M. J.; Leffler, A; Malmberg, AB; Martin, WJ; Trafton, J; Petersen-Zeitz, KR; Koltzenburg, M; Basbaum, AI; Julius, D (2000). "Impaired Nociception and Pain Sensation in Mice Lacking the Capsaicin Receptor". Science. 288 (5464): 306–13. Bibcode:2000Sci...288..306C. doi:10.1126/science.288.5464.306. PMID 10764638.

외부 링크

  • Lariviere, William R; Wilson, Sonya G; Laughlin, Tinna M; Kokayeff, Anna; West, Erin E; Adhikari, Seetal M; Wan, You; Mogil, Jeffrey S (2002). "Heritability of nociception. III. Genetic relationships among commonly used assays of nociception and hypersensitivity". Pain. 97 (1–2): 75–86. doi:10.1016/S0304-3959(01)00492-4. PMID 12031781. S2CID 17419719.
  • Le Bars, Daniel; Gozariu, Manuela; Cadden, Samuel W. (2001). "Animal Models of Nociception". Pharmacological Reviews. 53 (4): 597–652. PMID 11734620.
  • Wilson, Sonya G.; Mogil, Jeffrey S. (2001). "Measuring pain in the (knockout) mouse: Big challenges in a small mammal". Behavioural Brain Research. 125 (1–2): 65–73. doi:10.1016/S0166-4328(01)00281-9. PMID 11682095. S2CID 2556160.
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