GFAJ-1

GFAJ-1
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GFAJ-1 (grown on arsenic).jpg
비산염을 함유한 배지에서 배양된 세균 GFAJ-1의 확대 세포
과학적 분류
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GFAJ-1할로모나스과에 속하는 막대 모양의 박테리아 변종이다.미국 지질조사국(US Geology Survey)에 상주하는 지구생물학자 펠리사 울프 시몬(Felisa Wolfe-Simon)이 캘리포니아 동부알칼리성 모노 호수에서 분리한 극호성 동물이다.2010년 사이언스 저널에서 [1]저자들은 미생물이 에 굶주렸을 때 성장을 [2][3]지속하기 위해 인의 적은 부분을 비소로 대체할 수 있다고 주장했다.발표 직후 다른 미생물학자들과 생화학자들이 이 주장에 대해 의문을 표시했고, 과학계는 이 주장에 대해 강하게 비판했습니다.2012년에 발표된 후속 독립 연구에서는 GFAJ-1의 DNA에서 검출 가능한 비산염이 발견되지 않았으며, 이러한 주장을 반박했으며, GFAJ-1은 단순히 비산 내성 인산염 의존성 [4][5][6][7]유기체임을 입증했다.

검출

울프-사이먼 앳 모노레이크,

GFAJ-1 박테리아는 지구미생물학자 펠리사 울프-시몬의해 발견되었는데, 그는 캘리포니아 [8]멘로 파크에 있는 미국 지질조사국상주하고 있다.GFAJ는 "Give Felisa a Job"[9]의 약자입니다.이 유기체는 2009년부터 그녀와 그녀의 동료들이 캘리포니아 모노 호수 바닥의 퇴적물에서 채취한 샘플로부터 분리 배양되었다. 미국 [10]모노 호수는 과염(약 90그램/리터)과 고알칼리성(pH 9.8)[11]이다.또한 세계에서 가장 높은 비소 농도(200μM)[1]를 가지고 있습니다.이 발견은 2010년 [2]12월 2일에 널리 발표되었다.

분류 및 계통발생

대장균주 O157:H7

할로모나스알칼리필라

할로모나스 정맥주 NBSL13

GFAJ-1

할로모나스 스펜서GTW

할로모나스 스펜서G27

할로모나스 스펜서DH77

할로모나스 sp. mp3

할로모나스 스펜서IB-O18

할로모나스 스펜서ML-185

리보솜 DNA [12]배열에 기초한 GFAJ-1의 계통 발생.

16S rRNA 배열에 기초한 분자 분석 결과, GFAJ-1은 할로모나다과(Halomonadaceae)의 다른 적당한 친염(salt-loving) 박테리아와 밀접한 관련이 있는 것으로 나타났다.저자들은 균주가 H. alkaliphila와 H. [12]venusta를 포함한 할로모나스의 구성원들 사이에 내포된 분지도(cradogram)를 작성했지만, 균주를 명시적으로 그 [1][10]속에 할당하지는 않았다.많은 박테리아는 높은 수준의 비소를 견딜 수 있고 세포에 [1][13]비소를 흡수하는 성질을 가진 것으로 알려져 있다.그러나, GFAJ-1은 한 단계 더 나아가도록 논쟁적으로 제안되었고, 인이 결핍되었을 때, 대신 대사물과 고분자에 비소를 함유하여 성장을 [10]지속하는 것이 제안되었다.

GFAJ-1 박테리아의 게놈 배열은 현재 [14]GenBank에 게시되어 있다.

종 또는 균주

모노 호숫가를 따라 펼쳐진 투파층

사이언스지 기사에서 GFAJ-1은 새로운 [1]종이 아니라 할로모나과의 변종이라고 언급된다.박테리아 국제명칭법, 박테리아 분류법규정하는 일련의 규정, 그리고 국제 계통진화 미생물학 저널의 특정 기사는 새로운 종을 기술하기 위한 지침과 최소한의 기준을 포함하고 있다.예를 들어 할로모나과의 구성원을 기술하기 위한 최소한의 기준이다.유기체는 특정 생리적, 유전적 조건을 충족하면 새로운 종으로 기술된다.[15] 예를 들어, 일반적으로 알려진 다른[16] 종에 대한 16S rRNA 배열 동일성 97% 미만이거나 다른 종과 구별될 수 있는 대사 차이이다.새로운 종과 다른 종을 구별하기 위한 지표 외에 지방산 조성, 사용된 호흡 퀴논 및 적어도 2개의 미생물 저장소 내 균주의 내성 범위 및 퇴적 등 다른 분석이 필요하다.새로운 제안된 이름은 sp. 11. 뒤에 이탤릭체로 지정된다(그 분류군[17][18]설명에 따라 새로운 속인 경우에는 gen. 11).

GFAJ-1 균주의 경우 이들 기준을 충족하지 못하며 균주가 새로운 [1]종이라고 주장되지 않는다.균주가 특정 종에 할당되지 않은 경우(예를 들어 데이터나 선택지가 불충분하여), 종종 "sp"(즉, 해당 속종의 미결정 종) 및 균주 이름으로 라벨이 붙는다.GFAJ-1의 경우, 저자들은 변형률 지정만으로 변형률을 참조하도록 선택했습니다.GFAJ-1과 밀접하게 관련된 균주는 할로모나스 sp를 포함한다.GTW와 할로모나스 sp.G27, 둘 다 유효한 [19][20]종으로 묘사되지 않았다.저자들이 공식적으로 GFAJ-1 균주를 할로모나스속으로 지정했다면, 그 이름은 할로모나스 [10]sp로 붙여졌을 것이다.GFAJ-1.

Genome Taxonomy Database는 GFAJ-1의 잠정 종인 할로모나스 sp002966495를 지정했다.이는 균주가 계통학적으로 할로모나스에 속하며, 다른 정의된 종에 비해 유전자 전체의 유사성이 충분히 낮다는 것을 의미한다.균주 GTW와 균주 G27은 데이터베이스가 [21]분류를 실행할 수 있는 게놈을 가지고 있지 않다.

생화학

비산염에 대한 노출이 증가하는 상태에서 박테리아를 배양하기 위해 무인배지(시약 내 불순물 중 잔류 인산염 3.1 ± 0.3μM 함유)를 사용하였고, 초기 수준 0.1mM은 결국 40mM까지 증가하였다.비교 실험에 사용된 대체 매체는 비산염이 없는 높은 수준의 인산염(1.5mM)을 포함하거나 인산염을 첨가하거나 비산염을 첨가하지 않았습니다.GFAJ-1은 인산염 또는 비산염 배지에서 배양될 때 세포수가 여러 배로 증가될 수 있지만, 인산염과 비산염이 [1]첨가되지 않은 유사한 조성의 배지에 배치될 경우 성장할 수 없었다.비소가 공급되고 인이 부족한 박테리아(ICP-MS로 측정)의 인 함량은 건조 중량 기준 0.019(± 0.001)%에 불과했으며, 이는 인산염이 풍부한 배지에서 재배했을 때의 30분의 1이다.이 인 함량은 또한 세포 평균 비소 함량(0.19 ± 건조 [1]중량 기준 0.25%)의 약 10분의 1에 불과했다.ICP-MS에 의해 측정된 세포의 비소 함량은 매우 다양하며 일부 실험에서는 인 함량보다 낮을 수 있으며 다른 [22]실험에서는 최대 14배까지 높을 수 있다.나노-SIMS로 얻은 동일한 연구에서 얻은 다른 데이터는 비산염과 인산염이 첨가되지 않은 세포에서도 P:C 및 As:C 비율로 표현될 때 비소(As)에 비해 인산염([12]P)이 75배 이상 초과됨을 시사한다.비산염 용액에서 배양했을 때 GFAJ-1은 인산염 [2]용액에서 배양한 속도보다 60% 빠르게 성장했을 뿐이다.인산염이 부족한 박테리아는 세포 내 부피가 정상의 1.5배였으며, 더 큰 부피는 큰 "진공 같은 부위"[1]의 출현과 관련이 있는 것으로 보였다.

정의된 최소 배지에서 배양된 GFAJ-1 세포의 스캔 전자 현미경 사진 및 1.5 mM 인산염 보충

언제 연구원들은을 해결할 수 있다면 그것의 유통을 추적하기 위해 isotope-labeled 비산을 덧붙여 그들은 비소 세포 분수 정상기 세포 인이에서 박테리아의 단백질, 지질, ATP와 같은 대사 물질을 비롯한 DNA와 RNA.[2]Nucleic 산을 5를 통해 집중되고 있던 현재의 것을 발견했다.전 남편거래(페놀 포함 1개, 페놀-클로로포름 포함 3개, 클로로포름 추출 용제 포함 1개)에 이어 에탄올 침전.생체 분자에 비소가 포함되어 있다는 직접적인 증거가 아직 부족하지만, 방사능 측정은 이러한 박테리아에 의해 흡수된 비소의 약 10분의 1(11.0 ± 0.1%)이 핵산(DNA 및 RNA)과 p에 의해 추출되지 않은 다른 모든 공침전 화합물을 포함하는 분율로 끝났다는 것을 시사했다.불쾌한 [1]처사동위원소 표지 인산염에 대한 비교 대조 실험은 수행되지 않았다.2011년 중반 균주의 분포에 따라 다른 연구소가 독립적으로 발견의 유효성을 테스트하기 시작했습니다.브리티시컬럼비아대학로즈마리 레드필드는 성장조건에 관한 문제에 따라 GFAJ-1의 성장요건을 조사한 결과 균주가 액체 배양액보다 고체 한천 배지에서 더 잘 자라는 것을 발견했다.Redfield는 이것을 낮은 칼륨 수치 탓으로 돌렸고, 기본 ML60 배지의 칼륨 수치가 성장을 [23]지탱하기에 너무 낮을 수 있다는 가설을 세웠다.레드필드는 추가적인 문제(이온 강도, pH 및 폴리프로필렌 대신 유리 튜브 사용)를 발견하고 해결한 후 비산염이 성장을 약간 자극하지만 [24]주장된 것과 달리 배양물의 최종 밀도에는 영향을 미치지 않는다는 것을 발견했습니다.같은 그룹에 의한 질량 분석법을 사용한 후속 연구에서는 비산염이 [25]GFAJ-1의 DNA에 통합된다는 증거가 발견되지 않았다.

비산에스테르 안정성

폴리β-히드록시낙산염의 구조

DNA에 존재하는 비산에스테르와 같은 비산에스테르들은 일반적으로 [26]대응하는 인산 에스테르보다 가수 분해에 덜 안정적일 것으로 예상된다.DNAMAs는 DNA 구성 블록 dAMP의 구조적인 비소 유사체로서 중성 [27]pH에서 물 속 40분의 반감기를 가진다.뉴클레오티드를 서로 연결하는 비소체 결합의 물 속 반감기의 추정치는 [28]DNA의 포스포디에스터 결합의 3,000만 년과 비교하여 0.06초만큼 짧다.저자들은 이 박테리아가 [1][10]폴리β-히드록시부틸레이트(hydroxybutyrate)나 [29] 유효 농도를 낮추기 위한 다른 방법을 사용하여 비산에스테르를 어느 정도 안정화시킬 수 있다고 추측한다.폴리히드록시낙산염은 탄소 이외의 원소에 의해 성장이 제한되는 조건 하에서 에너지 및 탄소 저장을 위해 많은 박테리아에 의해 사용되며, 일반적으로 GFAJ-1 [30]세포에서 볼 수 있는 "진공과 같은 영역"과 매우 유사한 큰 왁시 과립으로 나타납니다.저자들은 불용성 폴리히드록시낙산염이 비산에스테르를 안정시키기 위해 세포질 내 물의 유효 농도를 충분히 낮출 수 있는 메커니즘을 제시하지 않았다.비록 모든 할로파일은 [31]탈수를 피하기 위해 어떤 방법으로든 세포질의 수분 활동을 감소시켜야 하지만, 세포질은 항상 수성 환경으로 남아 있습니다.

비판

NASA가 "외계 생명체의 증거를 찾는 데 영향을 미칠 것"이라는 기자회견을 발표한 것은 선정적이고 오해의 소지가 있다는 비판을 받았다. 뉴사이언티스트지의 한 사설은 "외계 생명체의 발견은 상상할 수 있는 가장 큰 이야기 중 하나일지라도, 이것은 그로부터 몇 광년 떨어진 이야기였다"[32][33]고 논평했다.

또한, 논문을 평가한 많은 전문가들은 보고된 연구들이 [34]저자들의 주장을 뒷받침할 충분한 증거를 제공하지 못한다고 결론지었다.Slate에 관한 온라인 기사에서, 과학 작가 Carl Zimmer는 몇몇 과학자들의 회의론에 대해 논의했다: "나는 12명의 전문가들에게 연락했다...거의 만장일치로, 그들은 NASA 과학자들이 자신들의 주장을 [35][36]펼치는데 실패했다고 생각합니다.화학자 스티븐 A. 베너비산염이 이 유기체의 DNA에서 인산염을 대체했다는 의구심을 표명했다.그는 울프-사이먼이 실험실 배양에서 사용한 배지의 미량 오염물질이 세포의 DNA에 필요한 인을 공급하기에 충분하다고 제안했다.그는 비소가 세포 [2][10]내 다른 곳에 격리되어 있을 가능성이 더 높다고 믿는다.브리티시컬럼비아 대학미생물학자 로즈마리 레드필드는 이 논문이 "비소가 DNA나 다른 어떤 생물학적 분자에 통합되었다는 어떤 설득력 있는 증거도 제시하지 못하고 있다"고 말했으며, 그 실험들은 그들의 [37][38]결론을 적절히 검증하는데 필요한 세척 단계와 제어가 부족했음을 시사한다.하버드 대학의 미생물학자 알렉스 브래들리는 비소가 함유된 DNA가 물 속에서 매우 불안정해 분석 과정에서 [35][39]살아남지 못했을 것이라고 말했다.

2010년 12월 8일, 사이언스는 울프-사이먼의 답변을 발표했는데, 그녀는 이 연구에 대한 비판이 예상되었다고 말했다.이에 대해,[40] 2010년 12월 16일, 「자주 묻는 질문」페이지가 게재되었습니다.연구팀은 GFAJ-1 균주를 ATCCDSMZ 배양액에 저장해 광범위한 [41]유통을 가능하게 할 계획이다.2011년 5월 하순에는 [42]저자의 연구실에서 직접 요청하여 균주를 이용할 수 있게 되었다.과학은 그 기사를 자유롭게 이용할 [43]수 있게 했다.이 기사는 Science 2011년 6월 3일자에 접수된 지 6개월 만에 출판되었습니다.이 출판물에는 기사의 실험 절차와 [44][45][46][47][48][49][50][51][52]결론에 관한 다양한 우려를 다루는 8개의 기술적 논평과 이러한 [42][53]우려에 대한 저자들의 답변이 첨부되었다.브루스 알버트 편집장은 몇 가지 문제가 남아 있으며 그 해결은 긴 과정이 [54]될 것이라고 지적했다.BioEssays 저널 2011년 3월호에 실린 로젠 [55]연구원의 리뷰는 과학 논문의 기술적 문제를 논의하고 대체 설명을 제공하며 미생물을 이용한 다른 비소 내성 및 비소의 알려진 생화학에 초점을 맞추고 있다.

2011년 5월 27일, 울프-사이먼과 그녀의 팀은 후속 사이언스 저널 [42]간행물에서 그 비판에 대해 답변했다.그리고 2012년 1월 브리티시컬럼비아 대학의 로지 레드필드가 이끄는 연구팀은 액체 크로마토그래피-질량분석법을 사용하여 GFAJ-1의 DNA를 분석했지만 비소를 검출할 수 없었다. 레드필드는 이를 원본 논문의 [56]"명백한 반박"이라고 불렀다.플로리다 마이애미 대학 연구팀은 인산염 대신 비산염이 공급된 배지의 GFAJ-1 성장에 대한 간단한 설명을 제공했다.대장균 실험실 균주의 리보솜에 방사성 동위원소(방사성 추적기 형성)를 표시한 후 비산염이 함유된 배지에서 세균 증식을 추적하였으나 인산염은 함유되지 않았다.그들은 비산염이 리보솜의 대규모 분해를 유발하여 비산 내성 박테리아의 느린 성장에 충분한 인산염을 제공한다는 것을 발견했다.마찬가지로, GFAJ-1 세포는 분해된 리보솜에서 인산염을 [57]비산염으로 대체하는 대신 재활용함으로써 성장한다.

웹사이트 Retraction Watch는 GFAJ-1을 최초로 기술한 원본 과학 기사의 결론에 이의를 제기하는 기사를 게재한 데 이어, 중요한 데이터의 [58][59]오보 때문에 원본 기사를 철회해야 한다고 주장했다.2021년 5월 현재, 종이는 [60]철회되지 않았습니다.

「 」를 참조해 주세요.

레퍼런스

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