단일 도메인 항체

Single-domain antibody
라마 VHH 도메인의 리본 다이어그램.
확장 CDR3 루프는 오렌지색입니다.

나노바디로도 알려진 단일 도메인 항체(sdAb)는 단일 단량체 가변 항체 도메인으로 이루어진 항체 단편이다.항체 전체와 마찬가지로 특정 항원에 선택적으로 결합할 수 있다.분자량이 12~15kDa에 불과한 단일 도메인 항체는 2개의 무거운 단백질 사슬과 2개의 경쇄로 구성된 일반 항체(150~160kDa)보다 훨씬 작으며, Fab 단편(약 50kDa, 경쇄 1개 및 중쇄 반쪽) 및 단일 체인 가변 단편(약 25kDa, 가변 도메인 2개, 1개)보다 훨씬 작다.무거운 [1]쇠사슬에서 나온 것).

첫 번째 단일 도메인 항체는 카멜로이드에서 발견되는 중쇄 항체로 제작되었습니다. 이러한 항체는 VH 단편이라고 불립니다H.연골어류도 중쇄항체(IgNAR, '면역글로불린신항원수용체')를 가지고 있어 V단편이라고 불리는NAR 단일 도메인 항체를 [2]얻을 수 있다.대체 접근법은 인간이나 생쥐의 일반적인 면역글로불린G(IgG)에서 이합체 변수 도메인을 단량체로 분할하는 것이다.비록 현재 단일 도메인 항체에 대한 대부분의 연구가 무거운 사슬 변수 도메인에 기초하고 있지만, 가벼운 사슬에서 파생된 나노체도 표적 에피토프에 [3]특이하게 결합하는 것으로 나타났다.

카멜리드 나노체는 항체만큼 특이하며, 어떤 경우에는 더 강력합니다.항체에 사용되는 것과 동일한 파지 패닝 절차를 사용하여 쉽게 분리할 수 있으므로 고농도로 시험관내 배양할 수 있다.작은 크기와 단일 도메인으로 인해 이러한 항체가 대량 생산을 위한 박테리아 세포로 쉽게 변환되어 연구 [4]목적에 이상적입니다.

단일 도메인 항체는 여러 약제 적용을 위해 연구되고 있으며 급성 관상동맥증후군, 암, 알츠하이머병 [5][6]및 Covid-19 치료에 [7]사용될 가능성이 있다.

특성.

단일 도메인 항체는 중쇄 항체 또는 공통 IgG의 1개의 가변 도메인(VH)을 포함하는 약 110개의 아미노산 길이의 펩타이드 사슬이다.이들 펩타이드는 항원과 항체 전체의 친화력이 비슷하지만 내열성이 더 높고 세제와 고농도의 요소에 대해 안정적이다.상보성 결정 영역 3(CDR3) 때문에 낙타 및 어류 항체에서 유래한 것은 친유성이 낮고 물에 더 잘 녹는다. CDR3는 일반적으로 가벼운 [8][9]사슬에 결합하는 친유성 부위를 덮는 확장 루프(위 리본 다이어그램에서 주황색으로 표시됨)를 형성한다.일반적인 항체와 대조적으로, 1999년 [10]연구에서 단일 도메인 항체 6개 중 2개는 항원 결합 능력을 잃지 않고 90°C(194°F)의 온도에서 살아남았다.위산과 단백질 분해 효소에 대한 안정성은 아미노산 배열에 따라 달라진다.일부 종은 경구 적용 [11][12]후 장에서 활성화되는 것으로 나타났지만, 장으로부터의 낮은 흡수율은 조직적으로 활성화된 단일 도메인 항체의 개발을 방해한다.

단일 도메인 항체와 단백질 항원의 복합체는 매립된 결합 [13]부위를 드러낸다.(왼쪽) 리조자임과 복합한 간호사 상어NAR V 단일 도메인(PDB 1T6V).(오른쪽)라이소자임(PDB 2EIZ)과 복합체화된 HyHEL-10 Fv

비교적 낮은 분자량은 조직의 투과성을 향상시키고,[1] 재생으로 제거되기 때문에 혈장 반감기를 짧게 한다.전체 항체와 달리 Fc 영역이 없기 때문에 보체 계통의 세포독성을 보이지 않습니다.카멜리드 및 어류 유래 sdAbs는 예를 들어 [13]효소의 활성 부위 등 전체 항체에 접근할 수 없는 숨겨진 항원에 결합할 수 있습니다.이 속성은 이러한 [9][14][13]매립지를 통과할 수 있는 확장 CDR3 루프가 원인인 것으로 나타났습니다.

생산.

일반 항체(오른쪽)와 비교하여 상어(왼쪽)와 낙타(가운데) 중쇄 항체.무거운 체인은 어두운 색조로 표시되고 가벼운 체인은 밝은 색조로 표시됩니다.V와HL V는 가변 도메인입니다.

중쇄 항체로부터

단도메다리, 낙타, 라마, 알파카 또는 상어를 원하는 항원으로 면역하고 중쇄 항체를 코드화한 mRNA의 후속 분리에 의해 단일 도메인 항체를 얻을 수 있다.대형[15] 파지가 표시된NAR V 및 VHH 단일 도메인 라이브러리는 젖상어와 [16]단봉낙타로부터 구축되었습니다.파지 디스플레이 및 리보솜 디스플레이와 같은 스크리닝 기술은 [17][15][18][16]항원과 결합하는 클론을 식별하는 데 도움이 됩니다.

기존 항체로부터

또는 4개의 [21]사슬을 가진 일반적인 쥐,[19] 토끼[20] 또는 인간 IgG로부터 단일 도메인 항체를 만들 수 있다.이 과정은 면역 또는 순진한 기증자의 유전자 라이브러리와 가장 특정한 항원을 식별하기 위한 표시 기술로 구성되어 있어 유사하다.이 접근법의 문제점은 공통 IgG의 결합 영역이 두 개의 도메인(V와L V)으로H 구성되어 있으며, 이들은 친유성 때문에 이량화되거나 집적되는 경향이 있다는 것이다.단량체화는 보통 친수성 아미노산으로 친유성을 대체함으로써 이루어지지만,[22] 종종 항원에 대한 친화력을 상실한 결과를 초래한다.친화력을 유지할 수 있는 경우, 단일 도메인 항체는 대장균,[20] 세레비시아이 또는 다른 유기체에서도 동일하게 생성될 수 있다.

인간의 단일 도메인 항체로부터

인간은 때때로 라이트 체인에서 정지 코돈의 무작위 생성에 의해 단일 도메인 항체를 생산한다.메소테린,[23] GPC2[24], GPC3를[25][26] 포함한 다양한 종양 항원을 대상으로 하는 인간 단일 도메인 항체를 파지 디스플레이에 의해 분리했다.인간 단일 도메인 항체는 암 치료를 위한 면역독신(HN3-PE38, HN3-mPE24, HN3-T20) 및 키메라 항원 수용체(CAR) T 세포를[24] 만드는 데 사용되어 왔다.HN3 인간 단도메인 항체에 의해 GPC3 단백질 코어상의 Wnt 결합 도메인을 차단함으로써 간암세포의 [29]Wnt 활성화를 억제한다.

잠재적인 응용 프로그램

단일 도메인 항체는 작은 크기, 단순한 생산 및 높은 [30][31]친화력으로 인해 치료적 용도뿐만 아니라 생명공학에 광범위한 응용을 가능하게 한다.

생명공학 및 진단

형광 단백질과 나노바디의 융합은 소위 색체를 생성한다.염색체는 살아있는 세포의 다른 구획에 있는 표적을 인식하고 추적하는 데 사용될 수 있다.그러므로 그것들은 살아있는 세포 현미경의 가능성을 증가시킬 수 있고 새로운 기능 [32]연구를 가능하게 할 것이다.항GFP 나노체와 GFP 나노랩이라고 불리는 1가 매트릭스의 결합은 추가적인 생화학적 [33]분석을 위해 GFP-융합 단백질과 그들의 상호작용하는 파트너의 분리를 가능하게 합니다.초해상도 이미징 기술을 사용한 단일 분자 국재화를 위해서는 표적 단백질에 근접하게 불소 포자를 특정 전달해야 한다.이들의 큰 크기 때문에 유기 염료에 결합된 항체를 사용하면 불소체와 표적 단백질 사이의 거리 때문에 종종 잘못된 신호를 초래할 수 있다.GFP 태그 부착 단백질을 대상으로 한 항GFP 나노체에 유기 염료를 융합시킴으로써 나노미터 공간 분해능과 높은 [34]친화력 때문에 연결 오류를 최소화할 수 있다.나노체의 크기 배당은 또한 상관성 있는 광전자 현미경 연구에 도움이 된다.투과제 없이 불소포자 부착 나노체에 화학 고정 세포의 세포질에 쉽게 접근할 수 있다.또한 크기가 작기 때문에 일반 항체보다 체적 샘플에 더 깊이 침투할 수 있습니다.형광 현미경과 전자 현미경으로 촬영된 조직에는 높은 초미세 구조가 보존되어 있습니다.이것은 분자 라벨링과 전자 현미경 [35]이미징을 모두 필요로 하는 신경과학 연구에 특히 유용합니다.

진단용 바이오센서 어플리케이션에서는 나노바이오체를 툴로서 전진적으로 사용할 수 있다.크기가 작기 때문에 바이오센서 표면에 더 촘촘하게 결합할 수 있습니다.접근성이 낮은 에피토프를 대상으로 하는 이점 외에도, 구조 안정성은 표면 재생 조건에 대한 높은 저항성으로 이어집니다.센서 표면에 단일 도메인 항체를 고정시킨 후 인체 전립선 특이 항원(hPSa)을 감지한 후 검사했다.나노체는 임상적으로 유의한 hPSa [36]농도를 검출하는 데 있어 고전적인 항체를 능가했다.

표적 분자의 결정화 확률을 높이기 위해 결정화 샤페론으로서 나노체를 이용할 수 있다.보조단백질로서, 그들은 배향상태의 일부만 결합하고 안정화시킴으로써 배향이질성을 감소시킬 수 있다.또한 결정화를 방해하는 표면을 마스킹하면서 결정 [37][31]접점을 형성하는 영역을 확장할 수 있습니다.

치료법

광열 치료를 위한 나노체.HER2와 같은 종양 항원과 결합할 수 있는 나노체는 광에너지를 흡수하고 열을 만들어 암세포를 죽이는 분기된 금 나노입자에 결합된다.

단일 도메인 항체는 여러 표적에 대한 새로운 치료 도구로 테스트되었습니다.인플루엔자 A 바이러스 아형 H5N1에 감염된 생쥐에서 헤마글루틴에 대해 유도된 나노체는 H5N1 바이러스의 생체 내 복제를 억제하고 이환률과 [38]사망률을 낮췄다.Clostridium difficile의 독성인자 독소 A와 독소 B의 세포수용체 결합 도메인을 대상으로 하는 나노체는 [39]시험관내 섬유아세포에서 세포역학적 효과를 중화시키는 것으로 나타났다.항원 제시 세포를 인식하는 나노바디 결합체는 종양 검출[40] 또는 표적 항원 전달에 성공적으로 사용되어 강력한 [41]면역 반응을 생성해 왔다.

돼지들의 대장균 유도 설사에 대한 경구 사용 가능한 단일 도메인 항체가 개발되어 성공적으로 [12]테스트되었다.염증성 장질환과 대장암과 같은 위장관의 다른 질병들도 경구적으로 이용 가능한 단일 도메인 [42]항체의 가능한 표적이다.

말라세지아 퍼푸의 표면단백질을 표적으로 하는 안정세제가 항비듬 [8]샴푸에 사용하도록 설계되었다.

HER2 항원에 결합하는 나노체는 유방암 세포와 난소암 세포에서 과도하게 발현되어 분지된 금 나노 입자에 결합되었다(그림 참조).종양세포는 실험 환경에서 레이저를 사용하여 광열적으로 파괴되었다.[43]

Von Willebrand 인자를 타겟으로 하는 단일 도메인 항체인 카플라시주맙은 급성 관상동맥증후군 [44]환자의 혈전증 예방을 위한 임상시험에 있다.고위험 경피적 관상동맥 개입에서 ALX-0081을 검사하는 2단계 연구는 2009년 [45]9월에 시작되었다.

Ablynx는 그들의 나노체가 혈액-뇌 장벽을 넘어 전체 항체보다 더 쉽게 큰 고형 종양에 침투할 수 있을 것으로 예상하며, 이것은 뇌암에 [42]대한 약물의 개발을 가능하게 할 것이다.

베타코로나바이러스(COVID-19를 일으키는 SARS-CoV-2 포함)의 스파이크 단백질의 RBD 도메인에 밀접하게 결합하고 세포 수용체 ACE2와의 스파이크 상호작용을 차단하는 나노체가 최근에 확인되었다[46][16].

다양한 고병원성 인간 코로나바이러스(HPHCoVs)에 의한 감염 예방 및 치료를 위한 다양한 단일 도메인 항체(나노체)의 적용이 보고되었다.사스-CoV-2와 유사한 바이러스와 결합하고 중화시키기 위해 나노바이체를 배치하는 것의 전망, 효능 및 도전은 최근에 [47]강조되었다.

나가나의 가장 일반적인 원인 중 하나인 Trypanosoma brucei brucei는 sdAbs의 표적이 될 수 있습니다.Stijlemans et al. 2004는 파지를 이용하여 척추동물의 면역계에 가변 표면 당단백질 항원을 표시함으로써 토끼와 카멜루스 드로메다리우스로부터 효과적인 sdAb를 유도하는 데 성공했다.미래에는, 이러한 치료법이 자연 항체의 큰 [48]크기 때문에 현재 도달할 수 없는 위치에 도달함으로써 자연 항체를 능가할 것이다.

레퍼런스

  1. ^ a b Harmsen MM, De Haard HJ (November 2007). "Properties, production, and applications of camelid single-domain antibody fragments". Applied Microbiology and Biotechnology. 77 (1): 13–22. doi:10.1007/s00253-007-1142-2. PMC 2039825. PMID 17704915.
  2. ^ English H, Hong J, Ho M (January 2020). "NAR single domain antibody sequences, phage libraries and potential clinical applications". Antibody Therapeutics. 3 (1): 1–9. doi:10.1093/abt/tbaa001. PMC 7034638. PMID 32118195.
  3. ^ Möller A, Pion E, Narayan V, Ball KL (December 2010). "Intracellular activation of interferon regulatory factor-1 by nanobodies to the multifunctional (Mf1) domain". The Journal of Biological Chemistry. 285 (49): 38348–61. doi:10.1074/jbc.M110.149476. PMC 2992268. PMID 20817723.
  4. ^ Ghannam A, Kumari S, Muyldermans S, Abbady AQ (March 2015). "Camelid nanobodies with high affinity for broad bean mottle virus: a possible promising tool to immunomodulate plant resistance against viruses". Plant Molecular Biology. 87 (4–5): 355–69. doi:10.1007/s11103-015-0282-5. PMID 25648551. S2CID 17578111.
  5. ^ "Nanobodies herald a new era in cancer therapy". The Medical News. 12 May 2004.
  6. ^ "Pipeline". Ablynx. Retrieved 20 January 2010.
  7. ^ Gill, Victoria (22 September 2021). "Covid: Immune therapy from llamas shows promise". BBC News.
  8. ^ a b Dolk E, van der Vaart M, Lutje Hulsik D, Vriend G, de Haard H, Spinelli S, et al. (January 2005). "Isolation of llama antibody fragments for prevention of dandruff by phage display in shampoo". Applied and Environmental Microbiology. 71 (1): 442–50. Bibcode:2005ApEnM..71..442D. doi:10.1128/AEM.71.1.442-450.2005. PMC 544197. PMID 15640220.
  9. ^ a b Stanfield RL, Dooley H, Flajnik MF, Wilson IA (September 2004). "Crystal structure of a shark single-domain antibody V region in complex with lysozyme". Science. 305 (5691): 1770–3. Bibcode:2004Sci...305.1770S. doi:10.1126/science.1101148. PMID 15319492. S2CID 25137728.
  10. ^ van der Linden RH, Frenken LG, de Geus B, Harmsen MM, Ruuls RC, Stok W, et al. (April 1999). "Comparison of physical chemical properties of llama VHH antibody fragments and mouse monoclonal antibodies". Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Protein Structure and Molecular Enzymology. 1431 (1): 37–46. doi:10.1016/S0167-4838(99)00030-8. PMID 10209277.
  11. ^ Harmsen MM, van Solt CB, Hoogendoorn A, van Zijderveld FG, Niewold TA, van der Meulen J (November 2005). "Escherichia coli F4 fimbriae specific llama single-domain antibody fragments effectively inhibit bacterial adhesion in vitro but poorly protect against diarrhoea". Veterinary Microbiology. 111 (1–2): 89–98. doi:10.1016/j.vetmic.2005.09.005. PMID 16221532.
  12. ^ a b Harmsen MM, van Solt CB, van Zijderveld-van Bemmel AM, Niewold TA, van Zijderveld FG (September 2006). "Selection and optimization of proteolytically stable llama single-domain antibody fragments for oral immunotherapy". Applied Microbiology and Biotechnology. 72 (3): 544–51. doi:10.1007/s00253-005-0300-7. PMID 16450109. S2CID 2319210.
  13. ^ a b c Ho M (June 2018). "Inaugural Editorial: Searching for Magic Bullets". Antibody Therapeutics. 1 (1): 1–5. doi:10.1093/abt/tby001. PMC 6086361. PMID 30101214.
  14. ^ Desmyter A, Transue TR, Ghahroudi MA, Thi MH, Poortmans F, Hamers R, et al. (September 1996). "Crystal structure of a camel single-domain VH antibody fragment in complex with lysozyme". Nature Structural Biology. 3 (9): 803–11. doi:10.1038/nsb0996-803. PMID 8784355. S2CID 10419927.
  15. ^ a b Feng, Mingqian; Bian, Hejiao; Wu, Xiaolin; Fu, Tianyun; Fu, Ying; Hong, Jessica; Fleming, Bryan D.; Flajnik, Martin F.; Ho, Mitchell (January 2019). "Construction and next-generation sequencing analysis of a large phage-displayed VNAR single-domain antibody library from six naïve nurse sharks". Antibody Therapeutics. 2 (1): 1–11. doi:10.1093/abt/tby011. ISSN 2516-4236. PMC 6312525. PMID 30627698.
  16. ^ a b c Hong, Jessica; Kwon, Hyung Joon; Cachau, Raul; Chen, Catherine Z.; Butay, Kevin John; Duan, Zhijian; Li, Dan; Ren, Hua; Liang, Tianyuzhou; Zhu, Jianghai; Dandey, Venkata P. (2022-05-03). "Dromedary camel nanobodies broadly neutralize SARS-CoV-2 variants". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 119 (18): e2201433119. doi:10.1073/pnas.2201433119. ISSN 1091-6490. PMID 35476528.
  17. ^ Arbabi Ghahroudi M, Desmyter A, Wyns L, Hamers R, Muyldermans S (September 1997). "Selection and identification of single domain antibody fragments from camel heavy-chain antibodies". FEBS Letters. 414 (3): 521–6. doi:10.1016/S0014-5793(97)01062-4. PMID 9323027.
  18. ^ Li, Dan; English, Hejiao; Hong, Jessica; Liang, Tianyuzhou; Merlino, Glenn; Day, Chi-Ping; Ho, Mitchell (2022-03-17). "A novel PD-L1-targeted shark VNAR single-domain-based CAR-T cell strategy for treating breast cancer and liver cancer". Molecular Therapy Oncolytics. 24: 849–863. doi:10.1016/j.omto.2022.02.015. ISSN 2372-7705. PMC 8917269. PMID 35317524.
  19. ^ Ward ES, Güssow D, Griffiths AD, Jones PT, Winter G (October 1989). "Binding activities of a repertoire of single immunoglobulin variable domains secreted from Escherichia coli". Nature. 341 (6242): 544–6. Bibcode:1989Natur.341..544W. doi:10.1038/341544a0. PMID 2677748. S2CID 4329440.
  20. ^ a b Feng R, Wang R, Hong J, Dower CM, Croix BS, Ho M (January 2020). "Isolation of rabbit single domain antibodies to B7-H3 via protein immunization and phage display". Antibody Therapeutics. 3 (1): 10–17. doi:10.1093/abt/tbaa002. PMC 7052794. PMID 32166218.
  21. ^ Holt LJ, Herring C, Jespers LS, Woolven BP, Tomlinson IM (November 2003). "Domain antibodies: proteins for therapy". Trends in Biotechnology. 21 (11): 484–90. doi:10.1016/j.tibtech.2003.08.007. PMID 14573361.
  22. ^ Borrebaeck CA, Ohlin M (December 2002). "Antibody evolution beyond Nature". Nature Biotechnology. 20 (12): 1189–90. doi:10.1038/nbt1202-1189. PMID 12454662. S2CID 7937915.
  23. ^ Tang Z, Feng M, Gao W, Phung Y, Chen W, Chaudhary A, et al. (April 2013). "A human single-domain antibody elicits potent antitumor activity by targeting an epitope in mesothelin close to the cancer cell surface". Molecular Cancer Therapeutics. 12 (4): 416–26. doi:10.1158/1535-7163.MCT-12-0731. PMC 3624043. PMID 23371858.
  24. ^ a b Li N, Fu H, Hewitt SM, Dimitrov DS, Ho M (August 2017). "Therapeutically targeting glypican-2 via single-domain antibody-based chimeric antigen receptors and immunotoxins in neuroblastoma". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (32): E6623–E6631. doi:10.1073/pnas.1706055114. PMC 5559039. PMID 28739923.
  25. ^ Feng M, Gao W, Wang R, Chen W, Man YG, Figg WD, et al. (March 2013). "Therapeutically targeting glypican-3 via a conformation-specific single-domain antibody in hepatocellular carcinoma". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (12): E1083-91. Bibcode:2013PNAS..110E1083F. doi:10.1073/pnas.1217868110. PMC 3607002. PMID 23471984.
  26. ^ a b Gao W, Tang Z, Zhang YF, Feng M, Qian M, Dimitrov DS, Ho M (March 2015). "Immunotoxin targeting glypican-3 regresses liver cancer via dual inhibition of Wnt signalling and protein synthesis". Nature Communications. 6: 6536. Bibcode:2015NatCo...6.6536G. doi:10.1038/ncomms7536. PMC 4357278. PMID 25758784.
  27. ^ Wang C, Gao W, Feng M, Pastan I, Ho M (May 2017). "Construction of an immunotoxin, HN3-mPE24, targeting glypican-3 for liver cancer therapy". Oncotarget. 8 (20): 32450–32460. doi:10.18632/oncotarget.10592. PMC 5464801. PMID 27419635.
  28. ^ Fleming BD, Urban DJ, Hall M, Longerich T, Greten T, Pastan I, Ho M (September 2019). "The engineered anti-GPC3 immunotoxin, HN3-ABD-T20, produces regression in mouse liver cancer xenografts via prolonged serum retention". Hepatology. 71 (5): 1696–1711. doi:10.1002/hep.30949. PMC 7069773. PMID 31520528.
  29. ^ Li N, Wei L, Liu X, Bai H, Ye Y, Li D, et al. (October 2019). "A Frizzled-Like Cysteine-Rich Domain in Glypican-3 Mediates Wnt Binding and Regulates Hepatocellular Carcinoma Tumor Growth in Mice". Hepatology. 70 (4): 1231–1245. doi:10.1002/hep.30646. PMC 6783318. PMID 30963603.
  30. ^ Muyldermans S (2013). "Nanobodies: natural single-domain antibodies". Annual Review of Biochemistry. 82: 775–97. doi:10.1146/annurev-biochem-063011-092449. PMID 23495938.
  31. ^ a b Gulati S, Jin H, Masuho I, Orban T, Cai Y, Pardon E, et al. (May 2018). "Targeting G protein-coupled receptor signaling at the G protein level with a selective nanobody inhibitor". Nature Communications. 9 (1): 1996. Bibcode:2018NatCo...9.1996G. doi:10.1038/s41467-018-04432-0. PMC 5959942. PMID 29777099.
  32. ^ Rothbauer U, Zolghadr K, Tillib S, Nowak D, Schermelleh L, Gahl A, et al. (November 2006). "Targeting and tracing antigens in live cells with fluorescent nanobodies". Nature Methods. 3 (11): 887–9. doi:10.1038/nmeth953. PMID 17060912. S2CID 29985078.
  33. ^ Rothbauer U, Zolghadr K, Muyldermans S, Schepers A, Cardoso MC, Leonhardt H (February 2008). "A versatile nanotrap for biochemical and functional studies with fluorescent fusion proteins". Molecular & Cellular Proteomics. 7 (2): 282–9. doi:10.1074/mcp.M700342-MCP200. PMID 17951627.
  34. ^ Ries J, Kaplan C, Platonova E, Eghlidi H, Ewers H (June 2012). "A simple, versatile method for GFP-based super-resolution microscopy via nanobodies". Nature Methods. 9 (6): 582–4. doi:10.1038/nmeth.1991. PMID 22543348. S2CID 12190938.
  35. ^ Fang T, Lu X, Berger D, Gmeiner C, Cho J, Schalek R, et al. (December 2018). "Nanobody immunostaining for correlated light and electron microscopy with preservation of ultrastructure". Nature Methods. 15 (12): 1029–1032. doi:10.1038/s41592-018-0177-x. PMC 6405223. PMID 30397326.
  36. ^ Saerens D, Frederix F, Reekmans G, Conrath K, Jans K, Brys L, et al. (December 2005). "Engineering camel single-domain antibodies and immobilization chemistry for human prostate-specific antigen sensing". Analytical Chemistry. 77 (23): 7547–55. doi:10.1021/ac051092j. PMID 16316161.
  37. ^ Koide S (August 2009). "Engineering of recombinant crystallization chaperones". Current Opinion in Structural Biology. 19 (4): 449–57. doi:10.1016/j.sbi.2009.04.008. PMC 2736338. PMID 19477632.
  38. ^ Ibañez LI, De Filette M, Hultberg A, Verrips T, Temperton N, Weiss RA, et al. (April 2011). "Nanobodies with in vitro neutralizing activity protect mice against H5N1 influenza virus infection". The Journal of Infectious Diseases. 203 (8): 1063–72. doi:10.1093/infdis/jiq168. PMID 21450996.
  39. ^ Hussack G, Arbabi-Ghahroudi M, van Faassen H, Songer JG, Ng KK, MacKenzie R, Tanha J (March 2011). "Neutralization of Clostridium difficile toxin A with single-domain antibodies targeting the cell receptor binding domain". The Journal of Biological Chemistry. 286 (11): 8961–76. doi:10.1074/jbc.M110.198754. PMC 3058971. PMID 21216961.
  40. ^ Fang T, Duarte JN, Ling J, Li Z, Guzman JS, Ploegh HL (February 2016). "Structurally Defined αMHC-II Nanobody-Drug Conjugates: A Therapeutic and Imaging System for B-Cell Lymphoma". Angewandte Chemie. 55 (7): 2416–20. doi:10.1002/anie.201509432. PMC 4820396. PMID 26840214.
  41. ^ Fang T, Van Elssen CH, Duarte JN, Guzman JS, Chahal JS, Ling J, Ploegh HL (August 2017). "Targeted antigen delivery by an anti-class II MHC VHH elicits focused αMUC1(Tn) immunity". Chemical Science. 8 (8): 5591–5597. doi:10.1039/c7sc00446j. PMC 5618788. PMID 28970938.
  42. ^ a b "Nanobodies". Nanobody.org. 2006.
  43. ^ Van de Broek B, Devoogdt N, D'Hollander A, Gijs HL, Jans K, Lagae L, et al. (June 2011). "Specific cell targeting with nanobody conjugated branched gold nanoparticles for photothermal therapy". ACS Nano. 5 (6): 4319–28. doi:10.1021/nn1023363. PMID 21609027.
  44. ^ "Ablynx Announces Interim Results of First Nanobody Phase I Study of,ALX-0081 (ANTI-VWF)". Bio-Medicine.org. 2 July 2007.
  45. ^ 임상시험 번호 NCT01020383 - "고위험 경피 관상동맥 개입(PCI) 환자의 ALX-0081 대 GPIIb/IIA 억제제 비교 연구" (ClinicalTrials.gov )
  46. ^ Wrapp, McLellan (2020). "Structural Basis for Potent Neutralization of Betacoronaviruses by Single-Domain Camelid Antibodies". Cell. 181 (5): 1004–1015.e15. doi:10.1016/j.cell.2020.04.031. PMC 7199733. PMID 32375025.
  47. ^ Konwarh, Rocktotpal (23 June 2020). "Nanobodies: Prospects of Expanding the Gamut of Neutralizing Antibodies Against the Novel Coronavirus, SARS-CoV-2". Frontiers in Immunology. 11: 1531. doi:10.3389/fimmu.2020.01531. PMC 7324746. PMID 32655584.
  48. ^ Muyldermans, Serge (2013-06-02). "Nanobodies: Natural Single-Domain Antibodies". Annual Review of Biochemistry. Annual Reviews. 82 (1): 775–797. doi:10.1146/annurev-biochem-063011-092449. ISSN 0066-4154. PMID 23495938. p. 788: Moreover...

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