라이트 시트 형광 현미경법

Light sheet fluorescence microscopy
라이트 시트 형광 현미경의 기본 설정.

라이트 시트 형광 현미경(LSFM)은 중간에서[1] 높은 광학 분해능을 가진 형광 현미경 기술이지만 광학 분할 능력이 우수하고 속도가 빠릅니다.에피 형광 현미경법과 달리, 관찰 방향에 수직으로 시료의 얇은 조각(일반적으로 수백 나노미터에서 수 마이크로미터)만 조명됩니다.조명에는 레이저 광시트가 사용된다.즉, 한 방향으로만 초점이 맞춰진 레이저 빔(예를 들어 원통형 렌즈를 사용한다)이다.두 번째 방법은 한 방향으로 주사된 원형빔을 사용하여 라이트시트를 생성한다.실제로 관찰된 부분만 조명되므로 생체 시료에 유발되는 광손상 및 응력을 저감할 수 있다.또, 양호한 광학 분할 기능은, 배경 신호를 저감 해, 공초점 현미경에 필적하는 높은 콘트라스트의 화상을 생성한다.LSFM은 (공초점 현미경처럼) 점 대신 빛의 평면을 이용해 샘플을 스캔하기 때문에 점 스캔 방식보다 100~1000배 빠른 속도로 이미지를 획득할 수 있다.

다른 현미경 조명 양식 비교(LSFM: 라이트시트 형광 현미경, WF: 와이드필드 현미경, CF: 공초점 현미경).LSFM은 양호한 z-단면(공초점)을 결합하고 관찰된 평면만 비춥니다.

이 방법은 세포[2] 생물학과 종종 화학적으로 깨끗한 온전한 장기, 배아, [3]유기체의 현미경 검사에 사용됩니다.

LSFM은 1994년부터 주로 대형 샘플에 대해 직교 평면 형광 광학 단면 현미경 검사 또는 [4]단층 촬영(OPFOS)으로 개발되었으며 이후 세포 이하의 [5]분해능을 가진 선택/단일 평면 조명 현미경 검사(SPIM)로도 개발되었습니다.이것은 형광 현미경에 조명 방식을 도입했고, 이것은 이미 초미세 [6]현미경이라는 이름으로 다크 필드 현미경에 성공적으로 사용되어 왔다.

LSFM 설정

기본 셋업

다양한 LSFM 구현의 그림.자세한 내용은 텍스트를 참조하십시오.범례: CAM=카메라, TL=튜브렌즈, F=필터, DO=시료대물, S=샘플, SC=시료실, PO=투사대물, CL=대물렌즈, SM=시료거울

이러한 현미경 [7]검사에서 조명은 관찰 방향에 대해 수직으로 이루어집니다(기사 상단에 있는 개략도 참조).레이저의 확장된 빔은 원통 렌즈 또는 원통 렌즈와 현미경 목적의 조합에 의해 한 방향으로만 초점이 맞춰집니다. 원통 렌즈와 현미경 목적의 조합은 원통 렌즈보다 더 나은 광학 품질과 높은 수치적 조리개를 사용할 수 있기 때문입니다.이렇게 하면 초점 영역에 얇은 라이트 시트 또는 라이트 시트가 생성되어 샘플의 얇은 슬라이스(일반적으로 몇 마이크로미터의 얇은 슬라이스)에서만 형광을 자극할 수 있습니다.

그런 다음 라이트 시트에서 방출되는 형광 빛은 표준 현미경 목적에 따라 수직으로 수집되어 이미지 센서(일반적으로 CCD, 전자 증배 CCD 또는 CMOS 카메라)에 투영됩니다.여기광학/라이트 시트를 위한 충분한 공간을 확보하기 위해 작업 거리가 긴 관찰 목표를 사용한다.대부분의 LSFM에서 검출 목표와 때로는 여기 목표가 샘플 버퍼에 완전히 담기 때문에 보통 샘플과 여기/검출 광학이 버퍼가 채워진 샘플 챔버에 내장되어 측정 중 환경 조건(온도, 이산화탄소 수준...)을 제어하는 데 사용될 수 있습니다.ent. LSFM의 장착 예는 아래에 자세히 설명되어 있습니다.

검출광학계의 들뜸광시트와 초점면이 모두 일치해야 화상을 형성하기 때문에 검출대상을 번역하는 것으로 시료의 다른 부분에 초점을 맞출 수 없고 통상 시료 전체를 번역하여 회전시킨다.

LSFM 기본 개념의 확장

최근 몇 년 동안 이 스킴에 대한 몇 가지 확장 기능이 개발되었습니다.

  • 두 개의 역전파 라이트시트를 사용하면 섀도우잉과 같은 일반적인 SPIM 아티팩트를 줄일 수 있습니다(위의 [8]첫 번째 z-스택 참조).
  • 광시트를 역전파하는 것 외에,[9][10] 2012년에는 마주보는 두 쪽에서 검출하는 설정이 제안되었다.이를 통해 z-stack 및 회전-stack을 측정하여 샘플의 전체 3D 재구성을 보다 빠르게 수행할 수 있습니다.
  • 라이트 시트는 일반 레이저 포커스를 위아래로 [11]스캔하여 생성할 수도 있습니다.이를 통해 조명용 자체 재구성 빔(예: 베셀 빔 또는 에어리 빔)을 사용할 수 있어 라이트 시트의 두꺼운 샘플에 대한 투과성을 개선할 수 있습니다. 라이트 시트에 대한 산란의 부정적인 영향이 [12][13][14][15]감소하기 때문입니다.이러한 자체 재구성 빔은 감쇠-보상 기법을 사용하여 강도 손실을 상쇄하도록 수정될 수 있으며 두꺼운 [16]샘플 내에서 수집된 신호를 더욱 증가시킬 수 있습니다.
  • OPM([17]사면 현미경 검사)에서 검출 목표는 라이트 시트를 만드는 데도 사용됩니다.이제 약 60°의 각도로 이 물체에서 라이트시트가 방출됩니다.검출에 사용되는 초점면을 같은 각도로 기울이기 위해서도 추가 광학이 사용됩니다.
  • LSFM은 또한 2광자(2P) 들뜸과 결합되어 두껍고 산란된 [18]샘플로의 침투가 개선되었습니다.근적외선 파장의 2P 들뜸은 시각적 [19]자극에 대한 반응을 수반하는 뇌 영상 실험에서 청색 가시 파장의 1P 들뜸을 대체하기 위해 사용되었습니다.
  • 또한 SPIM은 형광 상관 분광법과 같은 기술과 결합되어 살아있는 생물학적 [20][21]샘플 내에서 형광 입자(예: 형광 비즈, 양자 점 또는 형광 라벨 단백질)의 공간 분해 이동성 측정을 가능하게 한다.
  • 또한 SPIM 현미경과 게이트 화상 증강 카메라의 조합으로 형광 수명 지도(FLIM)를 측정할 수 있는 [22]것으로 보고되었다.
  • LSFM은 아베 [23][24]한계를 넘어 분해능을 개선하기 위해 초해상도 현미경 검사 기술과 결합되었습니다.또한 STED [25]효과로 인해 라이트 시트 두께를 감소시키는 자극 방출 고갈 현미경(STED)과 SPIM의 조합이 발표되었습니다.LSFM의 해상도에 관한 섹션도 참조해 주세요.
  • LSFM은 기본 공간 분해능과 형광 검출 [26]효율을 높이기 위해 높은 수치 개구부를 가진 립 기반 오일 주입 목표까지 포함하여 모든 목적에 적합하도록 수정되었습니다.이 기술은 검출 목적에 따라 조명 시트를 정확한 각도로 기울여 유리 커버 슬립 표면에 조명 시트를 형성할 수 있도록 합니다.
  • LSFM은 깊이 350 [27]um의 두껍고 비균질적인 샘플의 영상 촬영 깊이를 개선하기 위해 Adaptive Optics 기술과 2012년에 결합되었습니다.Shack Hartmann 파장 센서가 검출 경로에 배치되었으며 가이드 별은 근접 피드백 루프에 사용된다.저자는 [28]논문에서 LSFM의 조명 경로와 검출 경로 모두에 Adaptive Optics를 탑재하여 샘플에 의해 유발되는 수차를 교정하는 이점에 대해 설명합니다.

설치 예

LSFM을 위한 다양한 유형의 샘플 마운팅: 매달린 젤 실린더에 내장된 배아, 지지된 젤 실린더에서 자라는 식물, 유리에 부착된 셀, 샘플 봉투에 든 액체 샘플

LSFM(사면 현미경 검사 제외)에서 조명 및 검출 빔패스의 분리는 특수한 샘플 장착 방법을 필요로 합니다.현재까지 대부분의 LSFM은 조명 및 검출 빔패스가 수평면(위 그림 참조)에 위치하도록 제작되어 있으므로 샘플은 보통 샘플실 상단에서 샘플실 내부로 매달리거나 샘플실 내부의 수직 지지대에 놓여 있습니다.모든 종류의 샘플을 마운트하기 위한 몇 가지 방법이 개발되었습니다.

  • 고정(및 잠재적으로 지워진) 샘플은 간단한 지지대 또는 홀더에 접착할 수 있으며 이미징 중에 고정 용액에 남아 있을 수 있습니다.
  • 일반적으로 대형 생물은 위에서 매달린 (유리 또는 플라스틱) 모세관에서 샘플 챔버로 돌출된 부드러운 겔 실린더에 진정제를 투여하여 장착합니다.
  • 부착형 셀은 시료실에 매달린 작은 유리판에 배양할 수 있습니다.
  • 식물은 배지가 함유된 투명한 젤에서 자랄 수 있다.겔은 이미징 위치에서 잘리기 때문에 산란 및 [29]흡수에 의한 라이트시트 및 이미지 품질 저하가 발생하지 않습니다.
  • 액체 시료(예를 들어 형광 상관 분광학용)는 시료실 [21]내의 주변 침지 매체의 굴절률에 일치하는 얇은 플라스틱 포일로 이루어진 작은 봉투에 장착할 수 있다.

일부 LSFM은 표준 현미경 검사에서와 같이 샘플을 장착하고(예: 세포는 페트리 접시 바닥에서 수평으로 자라며), 들뜸 및 검출 광학이 위에서 직립 평면으로 구성된 곳에서 개발되었습니다.또한 LSFM을 표준 역현미경과 결합할 수 있으므로 특별한 샘플 장착 [20][30][31][32]절차가 필요하지 않습니다.

LSFM 이미지 속성

표준 이미징 모드

대부분의 LSFM은 샘플을 이미지 평면을 통해 이동하여 샘플의 3D 영상을 생성하는 데 사용됩니다.샘플이 이미지 센서의 시야보다 큰 경우 샘플도 옆으로 이동해야 합니다.다른 방법은 샘플 내에서 영상 평면을 이동하여 영상 [32]스택을 생성하는 것입니다.

예를 들어, 시간 간격에 걸쳐 10초-10분마다 기록된 스택을 사용하여 긴 실험을 수행할 수 있습니다.이를 통해 3D, 즉 4D 현미경의 시간 경과에 따른 변화를 연구할 수 있습니다.

이미지 획득 후 서로 다른 이미지 스택이 등록되어 하나의 3D 데이터 세트를 형성합니다.목적의[32] 역할을 바꾸거나 [8]샘플을 회전하여 샘플의 여러 뷰를 수집할 수 있습니다.뷰가 여러 개 있는 경우 단일 스택보다 더 많은 정보를 얻을 수 있습니다. 예를 들어 샘플의 일부 부분 폐색이 극복될 수 있습니다.또한 다중 보기를 사용하면 아래 설명된 것처럼 축 해상도가 낮아져 3D 영상 해상도가 향상됩니다.

일부 스터디에서는 SPIM을 사용하여 샘플의 한 슬라이스만 촬영하지만 훨씬 높은 시간 분해능으로 촬영합니다.이를 통해 제브라 물고기 배아의 뛰는 심장을 실시간으로 [33]관찰할 수 있습니다.샘플의 고속 번역 단계와 함께 고속 3D 입자 추적 기능이 [34]구현되었습니다.

해상도의 힘

SPIM의 가로 해상도는 검출 목적과 검출된 빛의 파장에 의해 완전히 결정되므로 표준(epi) 형광 현미경과 유사하다(Abe 한계 참조).예를 들어 525nm 주변의 녹색 스펙트럼 영역에서의 검출의 경우 250–500nm의 분해능에 도달할 [7]수 있다.축 분해능은 측면(약 4배)보다 나쁘지만, 거의 등방성 분해능이 [20]가능한 얇은 라이트 시트를 사용하여 개선할 수 있습니다.얇은 라이트 시트는 작은 영역(가우스 빔의 경우)에서만 얇거나 베셀 빔과 같은 특수 빔 프로파일을 사용해야 합니다(복잡성 추가 외에도 이러한 방식은 측면 로브를 추가하여 유해할[13] 수 있습니다).또는 동일한 샘플에서 가져온 3D 영상 스택을 다른 각도로 계산적으로 결합함으로써 등방성 분해능을 얻을 수 있습니다.그런 다음 한 스택에서 부족한 깊이 분해능 정보를 다른 스택에서 제공합니다. 예를 들어 두 개의 직교 스택에서 한 스택의 축 방향(해상도 낮음)은 다른 스택의 가로 방향(해상도 낮음)입니다.

LSFM의 가로 해상도는 예를 들어 단일 형광체가 사용된 광학 시스템의 공칭 해상도보다 훨씬 높은 공간 정밀도로 위치할 수 있다는 사실을 사용하여 Abe 한계를 넘어 향상될 수 있다(확률적 국재 현미경 기술 [23]참조).구조화 조명 라이트 시트 현미경법에서는 LSFM의 [24]광학 분할 용량을 더욱 개선하기 위해 구조화 조명 기술이 적용되었습니다.

스트라이프 아티팩트

상단: LSFM의 스트라이프 아티팩트.하단:피벗을 통한 스트라이프 아티팩트 감소

일반적으로 빛이 한쪽에서 샘플을 투과하기 때문에 라이트시트를 방해하는 장애물이 빛을 산란 및/또는 흡수하여 품질을 방해할 수 있습니다.이 경우 일반적으로 이미지에 어둡고 밝은 줄무늬가 나타납니다.샘플의 일부가 상당히 높은 굴절률(예: 세포 내 지질 소포)을 갖는 경우, 이러한 구조 뒤에 밝은 줄무늬가 생기는 집중 효과로 이어질 수 있다.이 아티팩트를 극복하기 위해 라이트 시트는 예를 들어 "발광"될 수 있습니다.즉, 라이트 시트의 입사 방향이 몇 도(~1 kHz 레이트) 빠르게 변화하기 때문에 빛이 장애물 뒤에 있는 영역에도 부딪힙니다.조명도 두 개의 (피벗된) 라이트 시트로 수행할 수 있습니다(위 참조). 이러한 [8]아티팩트를 더욱 줄일 수 있습니다.또는 VSNR(Variational Stationary Noise Remover)라는 알고리즘이 개발되어 무료 피지 플러그인으로 사용할 수 있습니다.[35]

역사

20세기 초에, R. A. 지그몬디는 암시장 현미경의 새로운 조명 체계로 초현미경을 도입했다.여기서 햇빛이나 흰색 램프는 정밀 슬릿을 비추는 데 사용됩니다.그런 다음, 슬릿은 응축기 렌즈에 의해 샘플로 이미징되어 라이트 시트를 형성합니다.산란(하회절) 입자는 현미경으로 수직으로 관찰할 수 있다.이 설정은 현미경의 분해능보다 작은 크기의 입자를 관찰할 수 있게 했고 1925년 [36]지그몬디로 노벨상을 수상하게 했다.

형광 현미경을 위한 이 조명 체계에 대한 첫 번째 적용은 1993년 Voie 등에 의해 발표되었다.직교 평면 형광 광학 섹션(OPFOS)[4]이라는 이름으로 달팽이관 내부 구조의 이미징을 위해 사용됩니다.그 때의 분해능은 가로 10µm, 세로 26µm로 제한되었지만 밀리미터 범위의 샘플 크기였다.OPFOS 현미경은 조명용으로 단순한 원통형 렌즈를 사용했다.SPIM의 추가 개발과 개선은 [5]2004년에 시작되었다.Huisken 등의 발표 이후 이 기법은 광범위하게 적용되었으며 오늘날에도 여전히 새로운 측정 상황에 적응하고 있다(위 참조).2010년 이후 형광 들뜸과 제한된[37] 분해능을 가진 최초의 초미세 현미경과 2012년 이후 최초의 SPIM이 [38]시판되고 있다.SPIM 개발에 대한 좋은 개요는 [39]참조 자료에 나와 있습니다.2012년에는 LSFM과 필요한 소프트웨어 [40][41][42][43]스위트를 위한 완전한 건설 계획을 자유롭게 공개하는 오픈 소스 프로젝트도 등장했습니다.

적용들

SPIM/LSFM은 종종 발달 생물학에서 사용되며, 배아 발달을 장기간(수일) 관찰할 수 있습니다(완전한 계통수 [5][44]재구축에도 해당).또한 SPIM은 형광 상관 분광법과 같은 기술과 결합하여 살아있는 생물학적 샘플 [20][21]내에서 형광 입자의 공간 분해 이동성 측정(예: 형광 비즈, 양자 점 또는 형광 단백질)을 가능하게 할 수 있다.

뇌나 신장과 같이 강하게 산란된 생물학적 조직은 SPIM으로 [45]촬영되기 전에 화학적으로 고정되고 클리어되어야 합니다.이를 위해 3DISCO, 큐빅 및 CLARITY와 같은 특수 조직 제거 기술이 개발되었습니다.클리어된 검체의 굴절률에 따라 일치하는 침지액과 특수 장거리 목표를 이미징 중에 사용해야 합니다.

  • H2B-HcRed. 1μm의 슬라이스 간격에서 100개의 슬라이스의 Z-스택을 발현하는 활구체의 SPIM 영상은 3분마다 기록되었다(10×목표, NA = 0.3).각 [46]시점의 z-stack의 최대 투영도가 표시됩니다.

  • ezDSLM을 [47]사용하여 얻은 DiI 라벨이 부착된 아메배의 자유로운 이동 이미지.

  • 녹색 형광 단백질의 사량체를 발현하는 Hela 세포.좌측에는 변속기 조명 이미지가, 우측에는 LSFM 이미지가 표시됩니다.그림자와 같은 전형적인 SPIM 아티팩트를 명확하게 볼 수 있습니다.라이트 시트는 아래쪽에서 위쪽을 향하고 있었다.

  • 위 이미지에서 z-stack의 체적 재구성.

  • A mouse brain (Thy-1 GFP-M) cleared using 3DISCO method and imaged by light-sheet microscopy.

    마우스 뇌(Thy-1 GFP-M)는 3DISCO법으로 클리어되어 라이트시트 현미경으로 촬영되었습니다.

레퍼런스

  1. ^ Fadero, T.C.; et al. (2018). "LITE microscopy: Tilted light-sheet excitation of model organisms offers high resolution and low photobleaching". The Journal of Cell Biology. 217 (5): 1869–1882. doi:10.1083/jcb.201710087. PMC 5940309. PMID 29490939.
  2. ^ Keller, Philipp J.; Stelzer, Ernst H. K. (2006). "Lichtscheiben-Mikroskopie in der molekularen Zellbiophysik" (PDF). Laborwelt. 7 (5): 18–21.
  3. ^ Tomer, Raju; Lovett-Barron, Matthew; Kauvar, Isaac; Andalman, Aaron; Burns, Vanessa M.; Sankaran, Sethuraman; Grosenick, Logan; Broxton, Michael; Yang, Samuel; Deisseroth, Karl (2015). "SPED Light Sheet Microscopy: Fast Mapping of Biological System Structure and Function". Cell. 163 (7): 1796–1806. doi:10.1016/j.cell.2015.11.061. ISSN 0092-8674. PMC 4775738. PMID 26687363.
  4. ^ a b A. H. Voie; D. H. Burns; F. A. Spelman (June 1993). "Orthogonal-plane fluorescence optical sectioning: Three-dimensional imaging of macroscopic biological specimens". Journal of Microscopy. 170 (3): 229–236. doi:10.1111/j.1365-2818.1993.tb03346.x. ISSN 0022-2720. PMID 8371260. S2CID 2901024.
  5. ^ a b c Huisken, J.; Swoger, J.; Del Bene, F.; Wittbrodt, J.; Stelzer, E. H. (2004). "Optical sectioning deep inside live embryos by selective plane illumination microscopy". Science. 305 (5686): 1007–1009. Bibcode:2004Sci...305.1007H. CiteSeerX 10.1.1.456.2250. doi:10.1126/science.1100035. PMID 15310904. S2CID 3213175.
  6. ^ Timo Mappes; Norbert Jahr; Andrea Csaki; Nadine Vogler; Juergen Popp; Wolfgang Fritzsche (5 November 2012). "The Invention of Immersion Ultramicroscopy in 1912-The Birth of Nanotechnology?". Angewandte Chemie International Edition. 51 (45): 11208–11212. doi:10.1002/anie.201204688. ISSN 1433-7851. PMID 23065955.
  7. ^ a b Greger, K; Swoger, J; Stelzer, EH (February 2007). "Basic building units and properties of a fluorescence single plane illumination microscope". Rev Sci Instrum. 78 (2): 023705–023705–7. Bibcode:2007RScI...78b3705G. doi:10.1063/1.2428277. PMID 17578115.
  8. ^ a b c Huisken, Jan; Stainier, Didier Y. R. (2007). "Even fluorescence excitation by multidirectional selective plane illumination microscopy (mSPIM)". Optics Letters. 32 (17): 2608–10. Bibcode:2007OptL...32.2608H. doi:10.1364/OL.32.002608. ISSN 0146-9592. PMID 17767321. S2CID 15231468.(설명 필요)
  9. ^ Tomer, Raju; Khairy, Khaled; Amat, Fernando; Keller, Philipp J (3 June 2012). "Quantitative high-speed imaging of entire developing embryos with simultaneous multiview light-sheet microscopy". Nature Methods. 9 (7): 755–763. doi:10.1038/nmeth.2062. ISSN 1548-7091. PMID 22660741. S2CID 14191130.(설명 필요)
  10. ^ Krzic, Uros; Gunther, Stefan; Saunders, Timothy E; Streichan, Sebastian J; Hufnagel, Lars (3 June 2012). "Multiview light-sheet microscope for rapid in toto imaging". Nature Methods. 9 (7): 730–733. doi:10.1038/nmeth.2064. ISSN 1548-7091. PMID 22660739. S2CID 13388657.(설명 필요)
  11. ^ Keller, P. J.; Schmidt, A. D.; Wittbrodt, J.; Stelzer, E.H.K. (14 November 2008). "Reconstruction of Zebrafish Early Embryonic Development by Scanned Light Sheet Microscopy" (PDF). Science. 322 (5904): 1065–1069. Bibcode:2008Sci...322.1065K. doi:10.1126/science.1162493. ISSN 0036-8075. PMID 18845710. S2CID 7594561.
  12. ^ Fahrbach, F. O.; Rohrbach, A. (November 2010). "A line scanned light-sheet microscope with phase shaped self-reconstructing beams". Optics Express. 18 (23): 24229–24244. Bibcode:2010OExpr..1824229F. doi:10.1364/oe.18.024229. PMID 21164769.
  13. ^ a b Planchon, T. A.; Gao, L.; Milkie, D. E.; Davidson, M. W.; Galbraith, J. A.; Galbraith, C. G.; Betzig, E. (2011). "Rapid three-dimensional isotropic imaging of living cells using Bessel beam plane illumination". Nature Methods. 8 (5): 417–423. doi:10.1038/nmeth.1586. PMC 3626440. PMID 21378978.
  14. ^ Vettenburg, Tom; Dalgarno, Heather I C; Nylk, Jonathan; Coll-Lladó, Clara; Ferrier, David E K; Čižmár, Tomáš; Gunn-Moore, Frank J; Dholakia, Kishan (2014). "Light-sheet microscopy using an Airy beam" (PDF). Nature Methods. 11 (5): 541–544. doi:10.1038/nmeth.2922. hdl:10023/5521. PMID 24705473. S2CID 205422713.
  15. ^ Kafian, Hosein; Lalenejad, Meelad; Moradi-Mehr, Sahar; Akbari Birgani, Shiva; Abdollahpour, Daryoush (2020). "Light-Sheet Fluorescence Microscopy with Scanning Non-diffracting beams". Scientific Reports. 10 (1): 8501. doi:10.1038/s41598-020-63847-2. PMID 32444603.
  16. ^ Nylk, Jonathan; McCluskey, Kaley; Preciado, Miguel A.; Mazilu, Michael; Yang, Zhengyi; Gunn-Moore, Frank J.; Aggarwal, Sanya; Tello, Javier A.; Ferrier, David E. K. (1 April 2018). "Light-sheet microscopy with attenuation-compensated propagation-invariant beams". Science Advances. 4 (4): eaar4817. arXiv:1708.02612. Bibcode:2018SciA....4.4817N. doi:10.1126/sciadv.aar4817. PMC 5938225. PMID 29740614.
  17. ^ Dunsby, C. (2008). "Optically sectioned imaging by oblique plane microscopy". Optics Express. 16 (25): 20306–16. Bibcode:2008OExpr..1620306D. doi:10.1364/OE.16.020306. hdl:10044/1/53595. ISSN 1094-4087. PMID 19065169.
  18. ^ Zeno Lavagnino; Francesca Cella Zanacchi; Emiliano Ronzitti; Alberto Diaspro (2013). "Two-photon excitation selective plane illumination microscopy (2PE-SPIM) of highly scattering samples: characterization and application". Optics Express. 21 (5): 5998–6008. Bibcode:2013OExpr..21.5998L. doi:10.1364/OE.21.005998. ISSN 1094-4087. PMID 23482168.
  19. ^ Wolf S, Supatto W, Debregeas G, Mahou P, Kruglik SG, Sintes J, Beaurepaire E, Candelier R (May 2015). "Whole-brain functional imaging with two-photon light-sheet microscopy". Correspondence. Nature Methods. 12 (5): 379–80. doi:10.1038/nmeth.3371. PMID 25924070. S2CID 19746295.
  20. ^ a b c d Capoulade, J.; Wachsmuth, M.; Hufnagel, L.; Knop, M. (2011). "Quantitative fluorescence imaging of protein diffusion and interaction in living cells". Nature Biotechnology. 29 (9): 835–839. doi:10.1038/nbt.1928. PMID 21822256. S2CID 10493584.
  21. ^ a b c Wohland, T.; Shi, X.; Sankaran, J.; Stelzer, E. H. (May 2010). "Single plane illumination fluorescence correlation spectroscopy (SPIM-FCS) probes inhomogeneous three-dimensional environments". Optics Express. 18 (10): 10627–10641. Bibcode:2010OExpr..1810627W. doi:10.1364/oe.18.010627. PMID 20588915.
  22. ^ Klaus Greger; Manuel J. Neetz; Emmanuel G. Reynaud; Ernst H.K. Stelzer (2011). "Three-dimensional Fluorescence Lifetime Imaging with a Single Plane Illumination Microscope provides an improved Signal to Noise Ratio". Optics Express. 19 (21): 20743–50. Bibcode:2011OExpr..1920743G. doi:10.1364/OE.19.020743. ISSN 1094-4087. PMID 21997084.
  23. ^ a b Francesca Cella Zanacchi; Zeno Lavagnino; Michela Perrone Donnorso; Alessio Del Bue; Laura Furia; Mario Faretta; Alberto Diaspro (9 October 2011). "Live-cell 3D super-resolution imaging in thick biological samples". Nature Methods. 8 (12): 1047–1049. doi:10.1038/nmeth.1744. ISSN 1548-7091. PMID 21983925. S2CID 205420075.
  24. ^ a b Jerome Mertz; Jinhyun Kim (2010). "Scanning light-sheet microscopy in the whole mouse brain with HiLo background rejection". Journal of Biomedical Optics. 15 (1): 016027–016027–7. Bibcode:2010JBO....15a6027M. doi:10.1117/1.3324890. ISSN 1083-3668. PMC 2917465. PMID 20210471.
  25. ^ 를 클릭합니다Friedrich, Mike; Gan, Qiang; Ermolayev, Vladimir; Harms, Gregory S. (2011). "STED-SPIM: Stimulated Emission Depletion Improves Sheet Illumination Microscopy Resolution". Biophysical Journal. 100 (8): L43–5. Bibcode:2011BpJ...100L..43F. doi:10.1016/j.bpj.2010.12.3748. PMC 3077687. PMID 21504720..
  26. ^ Fadero TC, et al. 2017. "LITE 현미경 검사: 높은 수치 개구부, 낮은 광 표백 형광 이미징 기술" bioRxiv doi: https://www.biorxiv.org/content/early/2017/10/04/181644.1
  27. ^ Jorand R, et al. 2012."두꺼운 비균질 샘플의 깊고 투명한 광학 이미징" PLOS one doi:https://doi.org/10.1371/journal.pone.0035795
  28. ^ Jorand R, 2013."Amériation des voies de détection et d'd'd'd'd'd'd'd'de d'd'de d'disphérodesdes" theses.fr
  29. ^ Alexis Maizel, Daniel von Wangenheim, Fern n Federici, Jim Haseloff, Ernst H.K. Stelzer (October 2011). "High-resolution live imaging of plant growth in near physiological bright conditions using light sheet fluorescence microscopy". The Plant Journal. 68 (2): 377–385. doi:10.1111/j.1365-313X.2011.04692.x. ISSN 0960-7412. PMID 21711399.{{cite journal}}: CS1 maint: 여러 이름: 작성자 목록(링크)
  30. ^ Terrence F. Holekamp; Diwakar Turaga; Timothy E. Holy (13 March 2008). "Fast Three-Dimensional Fluorescence Imaging of Activity in Neural Populations by Objective-Coupled Planar Illumination Microscopy". Neuron. 57 (5): 661–672. doi:10.1016/j.neuron.2008.01.011. ISSN 0896-6273. PMID 18341987. S2CID 9571663.
  31. ^ Y. Wu; A. Ghitani; R. Christensen; A. Santella; Z. Du; G. Rondeau; Z. Bao; D. Colon-Ramos; H. Shroff (25 October 2011). "Inverted selective plane illumination microscopy (iSPIM) enables coupled cell identity lineaging and neurodevelopmental imaging in Caenorhabditis elegans". Proceedings of the National Academy of Sciences. 108 (43): 17708–17713. Bibcode:2011PNAS..10817708W. doi:10.1073/pnas.1108494108. ISSN 0027-8424. PMC 3203761. PMID 22006307.
  32. ^ a b c Wu, Yicong; Wawrzusin, Peter; Senseney, Justin; Fischer, Robert S; Christensen, Ryan; Santella, Anthony; York, Andrew G; Winter, Peter W; Waterman, Clare M; Bao, Zhirong; Colón-Ramos, Daniel A; McAuliffe, Matthew; Shroff, Hari (2013). "Spatially isotropic four-dimensional imaging with dual-view plane illumination microscopy". Nature Biotechnology. 31 (11): 1032–1038. doi:10.1038/nbt.2713. ISSN 1087-0156. PMC 4105320. PMID 24108093.
  33. ^ "Webpage Huisken Lab". Archived from the original on 7 July 2014.
  34. ^ Jörg G. Ritter; Roman Veith; Jan-Peter Siebrasse; Ulrich Kubitscheck (2008), "High-contrast single-particle tracking by selective focal plane illumination microscopy", Optics Express, vol. 16, no. 10, pp. 7142–52, Bibcode:2008OExpr..16.7142R, doi:10.1364/OE.16.007142, ISSN 1094-4087, PMID 18545417
  35. ^ Jerome Fehrenbach; Pierre Weiss; Corinne Lorenzo (2012). "Variational Algorithms to Remove Stationary Noise: Applications to Microscopy Imaging" (PDF). IEEE Transactions on Image Processing. 21 (10): 4420–4430. Bibcode:2012ITIP...21.4420F. doi:10.1109/TIP.2012.2206037. ISSN 1057-7149. PMID 22752131. S2CID 6828193.
  36. ^ R. A. 지그몬디의 노벨 강연: 콜로이드 특성(초현미경에 대한 간단한 설명 포함)
  37. ^ 2013년 12월 24일 웨이백 머신에서 LaVision Biotechive Archived 보도 자료(2012-11-04 액세스)
  38. ^ Carl Zeiss 라이트시트 Z.1 라이트시트 현미경 시스템에 대한 보도 자료(2012-11-15 액세스)
  39. ^ P. A. Santi (1 February 2011). "Light Sheet Fluorescence Microscopy: A Review". Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 59 (2): 129–138. doi:10.1369/0022155410394857. ISSN 0022-1554. PMC 3201139. PMID 21339178.
  40. ^ OpenSPIM 프로젝트 웹페이지(2013-06-08 접속)
  41. ^ Peter G Pitrone; Johannes Schindelin; Luke Stuyvenberg; Stephan Preibisch; Michael Weber; Kevin W Eliceiri; Jan Huisken; Pavel Tomancak (9 June 2013). "OpenSPIM: an open-access light-sheet microscopy platform". Nature Methods. 10 (7): 598–9. arXiv:1302.1987. doi:10.1038/nmeth.2507. ISSN 1548-7091. PMC 7450513. PMID 23749304.
  42. ^ OpenSPIN 프로젝트 웹 페이지(2013-06-08)
  43. ^ Emilio J Gualda, Tiago Vale, Pedro Almada, Jos A Feij, Gabriel G Martins, Nuno Moreno (9 June 2013). "OpenSpinMicroscopy: an open-source integrated microscopy platform". Nature Methods. 10 (7): 599–600. doi:10.1038/nmeth.2508. ISSN 1548-7091. PMID 23749300. S2CID 27935584.{{cite journal}}: CS1 maint: 여러 이름: 작성자 목록(링크)
  44. ^ Verveer, P. J.; Swoger, J.; Pampaloni, F.; Greger, K.; Marcello, M.; Stelzer, E. H. (2007). "High-resolution three-dimensional imaging of large specimens with light sheet-based microscopy". Nature Methods. 4 (4): 311–313. doi:10.1038/nmeth1017. PMID 17339847. S2CID 12440781.
  45. ^ Jährling, Nina; Becker, Klaus; Wegenast-Braun, Bettina M.; Grathwohl, Stefan A.; Jucker, Mathias; Dodt, Hans-Ulrich (27 May 2015). Vitorica, Javier (ed.). "Cerebral β-Amyloidosis in Mice Investigated by Ultramicroscopy". PLOS ONE. 10 (5): e0125418. Bibcode:2015PLoSO..1025418J. doi:10.1371/journal.pone.0125418. ISSN 1932-6203. PMC 4446269. PMID 26017149.
  46. ^ Corinne Lorenzo; Céline Frongia; Raphael Jorand; Jérome Fehrenbach; Pierre Weiss; Amina Maandhui; Guillaume Gay; Bernard Ducommun; Valérie Lobjois (2011). "Live cell division dynamics monitoring in 3D large spheroid tumor models using light sheet microscopy". Cell Division. 6 (1): 22. doi:10.1186/1747-1028-6-22. ISSN 1747-1028. PMC 3274476. PMID 22152157.
  47. ^ Daisuke Takao; Atsushi Taniguchi; Takaaki Takeda; Seiji Sonobe; Shigenori Nonaka; Alexandre J. Kabla (5 December 2012), "High-Speed Imaging of Amoeboid Movements Using Light-Sheet Microscopy", PLOS ONE, vol. 7, no. 12, p. e50846, Bibcode:2012PLoSO...750846T, doi:10.1371/journal.pone.0050846, ISSN 1932-6203, PMC 3515486, PMID 23227214

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