나노 차등 스캐닝 형광 측정
Nano differential scanning fluorimetry |
NanoDSF는 고유 트립토판 또는 티로신 [1][2]형광을 사용하여 단백질 안정성을 결정하기 위한 변형된 차등 스캐닝 형광 측정 방법입니다.
단백질 안정성은 일반적으로 열 또는 화학적 전개 실험에 [3]의해 해결됩니다.열 전개 실험에서는 선형 온도 램프를 적용하여 단백질을 전개하는 반면 화학 전개 실험에서는 농도를 증가시키는 화학 변성제를 사용합니다.단백질의 열 안정성은 일반적으로 접혀진 상태에서 펴진 상태로 전환되는 중간 지점에 해당하는 단백질 모집단의 50%가 펼쳐지는 '용융 온도' 또는 'Tm'에 의해 설명됩니다.
기존의 DSF 방법과 달리, nanoDSF는 트립토판 또는 티로신 형광을 사용하여 단백질 전개를 모니터링합니다.형광 강도와 형광 최대값 모두 트립토판의 [4]가까운 주변 환경에 크게 의존합니다.따라서 350nm와 330nm에서의 형광 강도의 비율은 예를 들어 단백질 전개로 인한 단백질 구조의 변화를 감지하는 데 적합합니다.
그것의 응용은 항체 공학, 막 단백질 연구, 품질 관리 및 제제 [5][6]개발을 포함합니다.NanoDSF는 생명공학적 응용을 위한 효소 라이브러리의 녹는점을 신속하게 평가하기 위해 사용되었습니다.[7]
레퍼런스
- ^ Käufl F, Rapp F. "nanoDSF". NanoTemper Technologies GmbH.
{{cite journal}}:저널 요구 사항 인용journal=(도움말) - ^ "Protein Stability Measurement Instrument". Genetic Engineering & Biotechnology News. 35 (4). 15 February 2015. Archived from the original on 12 September 2015. Retrieved 9 March 2015.
- ^ Senisterra G, Chau I, Vedadi M (April 2012). "Thermal denaturation assays in chemical biology". Assay and Drug Development Technologies. 10 (2): 128–36. doi:10.1089/adt.2011.0390. PMID 22066913.
- ^ Lakowicz JR (2006). Principles of Fluorescence Spectroscopy (3rd ed.). Springer US. ISBN 978-0-387-31278-1.
- ^ Käufl F, Rapp F. "Application Notes: nanoDSF Technology". NanoTemper Technologies GmbH. Archived from the original on 2015-02-05. Retrieved 2015-03-02.
- ^ "App Notes". Unchained Labs.
- ^ Magnusson AO, Szekrenyi A, Joosten HJ, Finnigan J, Charnock S, Fessner WD (January 2019). "nanoDSF as screening tool for enzyme libraries and biotechnology development". The FEBS Journal. 286 (1): 184–204. doi:10.1111/febs.14696. PMC 7379660. PMID 30414312.
진일보한 내용
- de Lange O, Wolf C, Thiel P, Krüger J, Kleusch C, Kohlbacher O, Lahaye T (November 2015). "DNA-binding proteins from marine bacteria expand the known sequence diversity of TALE-like repeats". Nucleic Acids Research. 43 (20): 10065–80. doi:10.1093/nar/gkv1053. PMC 4787788. PMID 26481363.
- Linke P, Amaning K, Maschberger M, Vallee F, Steier V, Baaske P, et al. (April 2016). "An Automated Microscale Thermophoresis Screening Approach for Fragment-Based Lead Discovery". Journal of Biomolecular Screening. 21 (4): 414–21. doi:10.1177/1087057115618347. PMC 4800460. PMID 26637553.
