H&E 얼룩

H&E stain
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H&E 얼룩에서 보이는 주요 얼룩 유형
헤마톡실린과 에오신으로 염색된 망막(눈의 일부), 세포핵은 청자색으로 염색되고 세포외 물질은 분홍색으로 염색됩니다.

헤마톡실린 및 에오신 염색(또는 헤마톡실린 및 에오신 염색, 종종 H&E 염색 또는 HE 염색으로 약칭됨)은 조직학에서 사용되는 주요 조직 염색 중 하나입니다.[1][2][3] 의료 진단에서[1] 가장 널리 사용되는 얼룩으로 종종 금본위제입니다.[4] 예를 들어, 병리학자가 암이 의심되는 조직검사를 볼 때, 조직학적인 부분이 H&E로 얼룩질 가능성이 높습니다.

H&E는 헤마톡실린과 에오신이라는 두 가지 조직학적 얼룩의 조합입니다. 헤마톡실린은 세포핵을 보라색으로 염색하고, 에오신은 세포외 기질과 세포질을 분홍색으로 염색하며, 다른 구조는 이러한 색의 다양한 색조, 색조 및 조합을 취합니다.[5][6] 따라서 병리학자는 세포의 핵 부분과 세포질 부분을 쉽게 구별할 수 있으며, 추가적으로 염색으로부터의 전체적인 착색 패턴은 세포의 일반적인 배치와 분포를 보여주며 조직 샘플의 구조에 대한 전체적인 개요를 제공합니다.[7] 따라서, 패턴 인식은 전문가 자신과 (디지털 병리학에서) 전문가를 돕는 소프트웨어 모두에 의해 조직학적 정보를 제공합니다.

이 염색 조합은 1877년 화학자 N에 의해 소개되었습니다. 러시아 카산 제국대학의 위소츠키.[8][7]

사용하다

The H&E staining procedure is the principal stain in histology[3][7][2][5] in part because it can be done quickly,[7] is not expensive, and stains tissues in such a way that a considerable amount of microscopic anatomy[9][10] is revealed,[7][5][4] and can be used to diagnose a wide range of histopathologic conditions.[8] H&E 염색의 결과는 조직을 고정하는 데 사용되는 화학 물질이나 실험실 프로토콜의 약간의 불일치에 크게 의존하지 [11]않으며 이러한 요인은 조직학에서 일상적으로 사용되는 데 기여합니다.[7]

H&E 염색은 항상 모든 조직이나 세포 구조, 또는 화학 물질의 분포를 구별하기에 충분한 대비를 제공하지 않으며,[9] 이러한 경우에는 보다 구체적인 염색과 방법을 사용합니다.[10][7]

적용방법

주요 기사: Histology § 검체 준비 및 Hematoxylin
헤마톡실린 얼룩이 묻은 욕조에서 슬라이드를 제거하고 있습니다.

H&E 절차에 사용되는 헤마톡실린 용액(제형)을 준비하는 방법은 여러 가지가 있으며,[11][12][6] 또한 H&E 염색 슬라이드를 생산하기 위한 많은 실험실 프로토콜이 있으며,[9] 그 중 일부는 특정 실험실에 특정될 수 있습니다.[7] 표준 절차는 없지만 [11][9]세포핵이 파란색으로 염색되고 세포질과 세포외기질이 분홍색으로 염색된다는 점에서 관례에 의한 결과는 상당히 일치합니다.[7] 조직학 실험실은 특정 병리학자의 염색 양이나 유형을 조정할 수도 있습니다.[7]

조직이 수집되고 (종종 생검으로) 고정된 후, 그것들은 일반적으로 탈수되어 녹은 파라핀 왁스에 내장된 후, 생성된 블록은 마이크로톰에 장착되고 얇은 조각으로 자릅니다.[6] 슬라이스는 용매로 왁스를 제거하고 슬라이드에 부착된 조직 슬라이스는 재수화되어 염색 준비가 되는 현미경 슬라이드에 부착됩니다.[6] 또는 H&E 얼룩은 일반적으로 조직을 냉동시킨 후 cryostat(냉동 조직을 잘라내는 마이크로톰)에서 잘라 알코올에 고정시킨 후 염색하는 Mohs 수술에서 가장 많이 사용되는 얼룩입니다.[9]

H&E 염색법은 금속성 염 또는 매염과 혼합된 헤마톡실린을 도포한 후 종종 약산 용액으로 헹구어 과도한 염색(분화)을 제거한 후 약알칼리성 물에 청색을 입힙니다.[13][8][14] 헤마톡실린을 적용한 후 조직은 에오신(가장 일반적으로 에오신 Y)으로 대조염색됩니다.[6][8][7]

결과.

헤마톡실린은 케라토히알린 과립 및 석회화된 물질과 같은 몇 가지 다른 [6][15][14]조직과 함께 주로 세포의 핵을 파란색 또는 짙은 보라색으로 물들입니다. 에오신은 세포질과 콜라겐과[5][7][14] 같은 세포외 기질을 포함한 일부 다른 구조를 최대 5가지 색조의 분홍색으로 염색합니다.[8] 호산구성(호산에 의해 염색되는 물질)[5] 구조는 일반적으로 세포내 또는 세포외 단백질로 구성됩니다. Lewy 바디와 Mallory 바디는 호산구성 구조의 예입니다. 대부분의 세포질은 호산구성이며 분홍색으로 변합니다.[10][15] 적혈구는 강렬하게 빨갛게 물들었습니다.[citation needed]

행동양식

헤마톡실린의 산화된 형태인 [5][16][14]헤마틴은 활성 착색제이지만(매염제와 결합할 때), 염색은 여전히 헤마톡실린이라고 합니다.[8][13] 헤마톡실린은 매염제(가장 일반적으로 알루미늄 명반)와 결합할 때 흔히 염기성, 양전하성 또는 양이온성 얼룩을 "유사"[10]하는 것으로 간주됩니다.[5] 에오신은 음이온성(음전하성) 및 산성 얼룩입니다.[5][10] 헤말룸(알루미늄 이온과 헤마틴의 결합)[14]에 의한 핵 염색은 일반적으로 염료-금속 복합체가 DNA에 결합하기 때문이지만, 핵 염색은 조직 부분에서[14] DNA를 추출한 후에 얻어질 수 있습니다. 티오닌이나 톨루이딘 블루와 같은 염기성(양이온성) 염료에 의한 핵염색과는 메커니즘이 다릅니다.[10] 염기성 염료에 의한 염색은 헤말룸보다 산성도가 낮은 용액에서만 발생하며, 핵산의 선행 화학적 또는 효소적 추출에 의해 예방됩니다. 알루미늄과 헤마틴을 함께 보유하는 것과 유사한 배위 결합이 핵 염색질에 있는 단백질의 카르복시 그룹과 DNA에 결합한다는 증거가 있습니다.[citation needed]

호염성 및 호산구성이라고 하기 위해 구조가 산성이거나 염기성일 필요는 없습니다. 이 용어는 염료에 대한 세포 성분의 친화성에 기초합니다. 다른 색, 예를 들어 노란색과 갈색이 샘플에 존재할 수 있습니다; 그것들은 멜라닌과 같은 고유 색소에 의해 발생합니다. 기저층은 잘 보여야 하는 경우 PAS 얼룩이나 약간의 은빛 얼룩으로 염색해야 합니다. 망상 섬유는 또한 은 얼룩이 필요합니다. 소수성 구조는 또한 투명하게 유지되는 경향이 있습니다; 이들은 보통 지방, 예를 들어 지방, 뉴런 축삭 주위의 수초, 골지체 막이 풍부합니다.[citation needed]

H&E 염색조직의 예

  • Bone, cell nuclei (blue-purple), bone matrix (pink).
    뼈, 세포핵(파란색-보라색), 뼈 기질(분홍색).
  • Ductal carcinoma in situ (DCIS) in breast tissue, cell nuclei (blue-purple), extracellular material (pink).
    유방 조직의 도관암(ductal carcinoma in situ, DCIS), 세포핵(blue-purple), 세포외 물질(pink).
  • Lung tissue taken from an emphysema patient. Cell nuclei (blue-purple), red blood cells (bright red), other cell bodies and extracellular material (pink), and air spaces (white).
    폐기종 환자에게서 채취한 폐 조직입니다. 세포핵(파란색-보라색), 적혈구(밝은 빨간색), 기타 세포체 및 세포외 물질(분홍색), 공기 공간(흰색).
  • Muscle tissue, cell nuclei (blue-purple), cell body (pink).
    근육조직, 세포핵(파란색-보라색), 세포체(분홍색).
  • Basal cell carcinoma of the skin, cell nuclei (blue-purple), extracellular material (pink).
    피부의 기저세포암, 세포핵(파란색-보라색), 세포외 물질(분홍색).

참고문헌

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더보기

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  • 릴리 RD, Pizzolato P, Donaldson PT (1976) 가용성 메타크롬 매염 호수 염료를 사용한 핵 염색. 화학적 말단기 차단반응의 효과 및 조직 내에 인위적으로 산기를 도입하는 방법. 조직화학 49: 23–35.
  • Lewellyn BD(2009) alum-hematoxylin을 사용한 핵염색. 바이오텍. 히스토켐. 84: 159–177.
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외부 링크

위키미디어 커먼즈에는 H&E 얼룩과 관련된 미디어가 있습니다.

의정서