면역전극증
Immunoelectrophoresis
면역전극증은 전기영양증에 기초한 단백질의 분리 및 특성화와 항체와의 반응을 위한 여러 생화학적 방법의 총칭이다. 모든 종류의 면역전극증은 항체라고도 알려진 면역글로불린이 분리되거나 특징지어질 단백질과 반응할 것을 요구한다. 이 방법들은 20세기 후반에 광범위하게 개발되어 사용되었다. 다소 연대순으로: 면역전극성 분석(1차원 면역전극성 애드모듬 그라바르), 교차 면역전극성(2차원 정량 면역전극성 애드모듬 클라크와 프리먼 또는 ad modum Laurel), 로켓-임전극성(1차원 정량 면역전극성 애드모드 로렐), 융합형 면역전극성resis ad modum Svenden and Harboe ad ad admonoelectrophoresis ad modum Bøg-Hansen.
방법
전기영양증은 혈청과 소변의 M단백질을 분석한다. 면역전극의 두 가지 주요 원리는 구역전극과 면역투약이다.[1] 높은 pH(약 8.6)에서 완충된 약 1mm 두께의 1% 젤 슬래브로서 아가로스는 전통적으로 전기영동증과 항체와의 반응에 선호된다. 아가로스는 모공이 넓어 단백질의 자유로운 통과와 분리가 가능하지만 단백질과 특정 항체의 면역반응을 위한 닻을 제공하기 때문에 젤 매트릭스로 선택되었다. 높은 pH는 항체가 높은 pH에서 사실상 움직이지 않기 때문에 선택되었다. 수평 냉각판이 있는 전기식 기기는 일반적으로 전기식 기구에 권장되었다.
면역억제제는 젖은 아가로오스 젤에서 볼 수 있지만, 건조 젤에서 쿠마시 찬란한 파란색과 같은 단백질 얼룩으로 얼룩져 있다. SDS-gel 전기영양증과는 대조적으로 아가로스의 전기영양증은 조사 중인 단백질의 고유 구조와 활동을 보존하면서 원생 조건을 허용하므로 면역전자영양증은 전기영양성 분리 외에 효소 활동과 리간드 결합 등의 특성화를 허용한다.
면역세포분석 add modum Grabar는 면역세포증의 고전적인 방법이다. 단백질은 전기영양증(Electrophosis)에 의해 분리되고, 이후 분리된 단백질 옆의 수조에 항체가 적용되며, 서로에 대해 분리된 단백질과 항체가 확산된 기간 후에 면역세포가 형성된다. 면역전극 분석의 도입은 단백질 화학에 큰 힘을 주었고, 최초의 결과들 중 일부는 생물학적 유체와 생물학적 추출물에 들어 있는 단백질의 분해능이었다. 만들어진 중요한 관찰들 중에는 혈청 내의 많은 다른 단백질들, 여러 면역글로불린 계층의 존재, 그리고 그들의 전기적 이질성이 있었다.
교차면역전극증은 2차원 정량면역전극증(ad modum clarke and Freeman) 또는 admodum Laurell이라고도 한다. 이 방법에서 단백질은 1차원의 전기영양증 동안 먼저 분리되었다가 항체를 향해 확산되는 대신, 단백질은 2차원의 항체 함유 젤로 전기영양된다. 면역복귀는 제2차원의 전기영양 중에 이루어지며 면역복귀는 특징적인 종 모양을 하고 있는데 각 침전물은 하나의 항원을 나타내는 침전물이며, 침전물의 위치는 겔에 있는 특정 항체의 양뿐만 아니라 단백질의 양에 의존하므로 상대 정량화는 관류될 수 있다.오메드. 교차 면역전극증의 민감성과 해결력은 고전적인 면역전극 분석의 그것보다 많고 다양한 목적에 유용한 기술의 다양성이 있다. 교차 면역전극증은 생물학적 유체, 특히 인간 혈청, 생물학적 추출물의 단백질에 대한 연구에 사용되어 왔다.
로켓 면역전극증은 1차원 정량 면역전극이다. 이 방법은 자동화된 방법이 이용되기 전에 인간 혈청 단백질의 정량화에 사용되어 왔다.
퓨전 로켓 면역전극은 단백질 분리 실험에서 분수에 포함된 단백질의 상세한 측정에 사용되는 1차원 정량 면역전극기의 변형이다.
친화성 면역전극증은 다른 고분자 또는 리간드와의 특정한 상호작용이나 복잡한 형성을 통해 단백질의 전기생식 패턴의 변화를 기반으로 한다. 친화성 면역전극증은 예를 들어 강의와 같이 결합 상수의 추정이나 글리칸 함량 또는 리간드 결합과 같은 특정한 특징을 가진 단백질의 특성화에 사용되어 왔다. 일부 친화력 면역전극증은 고정된 리간드를 사용하여 친화력 크로마토그래피와 유사하다.
아가로오스 겔에 있는 면역복제제의 개방된 구조는 특정 단백질을 드러내기 위해 방사성 표지 항체의 추가 결합을 가능하게 할 것이다. 이러한 변화는 면역글로불린 E(IgE)와의 반응을 통한 알레르기 유발물질 식별에 이용되어 왔다.
두 가지 요인은 면역세포화 방법이 널리 사용되지 않는다고 결정한다. 첫째로, 그들은 오히려 일에 집중적이고 수작업적인 전문지식이 필요하다. 둘째로, 그들은 다소 많은 양의 다면체 항체를 요구한다. 오늘날 전기에 이은 젤 전기화합물은 조작의 용이성, 높은 민감도, 특정 항체에 대한 요구조건이 낮기 때문에 단백질 특성화에 선호되는 방법이다. 또한 단백질은 겉보기 분자량에 근거하여 젤 전기영양증에 의해 분리되는데, 이는 면역전극에 의해 달성되지 않지만 그럼에도 불구하고 면역전극법은 비절감 조건이 필요할 때 여전히 유용하다.
항임면역전극증 및 그 변형
바이러스 감염 테스트와 같은 다른 전통적인 진단 방법들과 비교했을 때, 면역 전극 방지증은 정교하고 값비싼 도구, 입력 재료 또는 장기 용량 구축이 필요 없는 매우 구체적이고 단순하며 빠른 방법이다. 대면역전극의 높은 정보성을 고려하면, 실제의 결과는 때때로 의심스러울 수 있다. 그 결과 제조된 앰프힐 형광체 함유 복합체를 사용하여 항원과 항체 상호작용을 증가시킴으로써 대임면역전극증 시술이 개선될 수 있다. 연구결과에 따르면 플루오르세인복합체-항생제 혼합물을 사용함으로써 출혈질환 예방접종을 받은 동물의 혈장수치 항체와의 연관성을 개선하고 침전구역 내 단백질 농도를 강화했다. 항원-항체 결합을 촉진하고 형광 축적 영역을 볼 수 있는 암피힐 형광체 복합체의 능력은 감염병 신속진단을 위한 대임면역전자의 효율을 향상시킬 수 있다.[3]
적용들
면역항암류
용어, 면역 방법론, 면역 화학 기법은 항체와 면역 방법론을 사용하여 결과가 식별되는 다양한 면역 전자공정을 가리킨다.[4] 그 결과 면역측정기의 민감도는 항체를 이용하는 데 드는 큰 비용에 비해 유리하다. 다양한 상황에서 단백질이 어떻게 이동하는지 보기 위해 많은 다른 종류의 아가로스 전기영양증이 사용된다. 단백질은 특정 항체를 가진 젤을 배양하여 타이머가 만료된 후에 인식되며, 그 다음엔 코마시 블루로 얼룩진다.[5]
방사면역투과
방사상 면역주사는 다른 모듈을 포함한 혼합물에서 특정 단백질의 농도를 결정하기 위한 면역측정 기법이다. 그것은 다른 것들과 마찬가지로 아가로스 젤로 구성되어 있다. 나아가 이 절차에서 물질은 젤의 핵심 부분의 둥근 우물에 넣어 그 사이로 흩어지게 되며, 확산된 결합 단백질 수와 직경이 관계된 증착 링이 생성된다.[6]
C3 단백질보충제 및 2D 면역전극체와의 나노물질 상호작용 확인
2D 면역전극증은 단백질 어금니 질량의 활동으로서 1차원과 등전점의 역할로서 2차원의 연속적으로 단백질 opsonization의 심층검사 등 이주민의 단백질 흐름을 수반하는 다양한 기능에 사용할 수 있는 잠재적 방법이다. 단백질을 다량 함유하고 있음에도 불구하고, 2D 젤의 각 점은 특정한 분자 질량과 특징을 가진 특정 단백질을 상징하게 될 것이다.[7]
생체내 전달 전 나노입자를 연구하는데 필수적인 요소인 신호전달경로의 자극을 검사하는 데 있어 2D 면역전극도 나노입자 수명, 목적지, 생체분포에 영향을 미치기 때문에 귀중한 구현으로 제공되고 있다. 이 방법은 2차원 수평 아가로오스 단백질 전기영동체를 채용하여 C3 단백질과의 나노입자의 연관성을 구체적으로 파악한다. 단백질은 분자질량(단백질량이 짧을수록 멀리 떠다니며)에 따라 1차원에서, 2차원은 그 풍부함에 따라 분리될 수 있다.
면역전극의 몇 가지 제한
면역전극증은 여러 가지 장점이 있지만 면역화 등 다른 전기전극 방식과 비교했을 때 이 방법이 지지부진하고 정밀도가 떨어지는 등 확실한 단점도 있다. 결과를 해석하는 것은 어려울 수 있다. 몇몇 작은 단핵 단백질은 식별하기 더 어려울 수 있다. 특정 항체의 접근성은 분석 기법에서의 그 효용성을 제한한다. 전통적인 (일반적이든 관습적이든) 면역전극증은 시간이 오래 걸리고 프로토콜이 완료되는 데 최대 3일이 걸릴 수 있다는 점, 구체성과 민감성이 제한되어 있다는 점, 그리고 결과를 읽기 어려울 수 있다는 점 등 여러 가지 단점이 있다. 그 결과, 새로운 면역전자기술은 종래의 면역전자기공법을 대체해 왔다.
참조
- ^ Homburger, Henry A.; Singh, Ravinder Jit (2008), "Assessment of proteins of the immune system", Clinical Immunology, Elsevier, pp. 1419–1434, doi:10.1016/b978-0-323-04404-2.10096-x, ISBN 9780323044042, retrieved 2021-09-27
- ^ Ling IT.; Cooksley S.; Bates PA.; Hempelmann E.; Wilson RJM. (1986). "Antibodies to the glutamate dehydrogenase of Plasmodium falciparum" (PDF). Parasitology. 92 (2): 313–324. doi:10.1017/S0031182000064088. PMID 3086819. S2CID 16953840.
- ^ Institute of Animal Biology, NAAS of Ukraine, Lviv, Ukraine; Ostapiv, D. D.; Kuz’mina, N. V.; Institute of Animal Biology, NAAS of Ukraine, Lviv, Ukraine; Kozak, М. R.; Institute of Animal Biology, NAAS of Ukraine, Lviv, Ukraine; Hu, Shan; Qingdao Agricultural University, Qingdao, China; Vlizlo, V. V.; State Scientific-Research Control Institute of Veterinary Medicinal Products and Feed Additives, Lviv, Ukraine; Kotsiumbas, I. Ya. (2021-02-22). "Application of fluorescein copolymer to improve the efficiency of counter-immunoelectrophoresis for diagnostics of animal infectious diseases". The Ukrainian Biochemical Journal. 93 (1): 104–112. doi:10.15407/ubj93.01.104. S2CID 233915465.
{{cite journal}}: CS1 maint : 복수이름 : 작성자 목록(링크) - ^ Vauthier, Christine; Bouchemal, Kawthar (2008-12-24). "Methods for the Preparation and Manufacture of Polymeric Nanoparticles". Pharmaceutical Research. 26 (5): 1025–1058. doi:10.1007/s11095-008-9800-3. ISSN 0724-8741. PMID 19107579. S2CID 22199493.
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- ^ Bertholon, Isabelle; Vauthier, Christine; Labarre, Denis (2006-05-25). "Complement Activation by Core–Shell Poly(isobutylcyanoacrylate)–Polysaccharide Nanoparticles: Influences of Surface Morphology, Length, and Type of Polysaccharide". Pharmaceutical Research. 23 (6): 1313–1323. doi:10.1007/s11095-006-0069-0. ISSN 0724-8741. PMID 16715369. S2CID 30404102.
