전기 블롯팅

Electroblotting
전송 스택의 도식적 표현.[1]

전기블롯팅은 젤 전기영양 후 PVDF나 니트로셀룰로오스를 이용해 단백질이나 핵산을 막으로 전달하는 분자생물학/생물화학/면역유전학의 방법이다.[2][3]단백질이나 핵산은 특정한 항체, 렉틴과 같은 리간드나 얼룩과 같은 탐침을 사용하여 추가로 분석될 수 있다.이 방법은 모든 폴리아크릴라미드와 아가로스겔과 함께 사용할 수 있다.젤에서 단백질을 옮기는 대체 기법은 모세관 점멸이다.null

개발

이 기술은 1989년 윌리엄 J. 리틀할레스(William J. Littlehales)에 의해 폴리아크릴라미드 전기영양증이나 젤 같은 시료를 막으로 옮기는 전자블롯 기법이라는 제목으로 특허를 얻었다.[1][4]null

전기 블로팅 절차

이 기법은 단백질이나 핵산을 막으로 몰기 위해 전류와 전달 완충 용액에 의존한다.전기영양증에 이어 표준탱크나 반건식 블롯트 전달시스템이 설치된다.트랜스퍼 버퍼 젤 PVDF에 적신 스펀지 3장 또는 트랜스퍼 버퍼 스펀지에 적신 니트로셀룰로오스 멤브레인 3장.전류와 샘플이 그 방향으로 이동하기 때문에, 막이 겔과 양전하 양극 사이에 위치하는 것이 필수적이다.스택이 준비되면 트랜스퍼 시스템에 넣어 사용 중인 재료에 따라 적절한 크기의 전류를 적절한 시간 동안 가한다.null

일반적으로 전기영양 젤은 충분한 양의 물질이 전달되었는지 확인하기 위해 이송 후 Coomassie 밝은 파란색으로 얼룩진다.단백질은 블롯팅하는 동안 그들 구조의 일부를 유지하거나 회복할 수 있기 때문에 면역블로팅이라는 용어를 만들어 내는 특정 항체와 반응할 수 있다.대신에 단백질은 친화력 블럭팅이라는 용어를 만들어 내는 강의와 같은 리간드와 반응할 수 있다.null

참고 항목

참조

  1. ^ a b R C Dubey (2014). Advanced Biotechnology. S. Chand Publishing. pp. 199–. ISBN 978-81-219-4290-4.
  2. ^ David Sheehan (30 April 2013). Physical Biochemistry: Principles and Applications. John Wiley & Sons. pp. 206–. ISBN 978-1-118-68748-2.
  3. ^ M. P. Bansal (1 January 2013). Molecular Biology and Biotechnology: basic experimental protocols. The Energy and Resources Institute (TERI). pp. 141–. ISBN 978-81-7993-379-4.
  4. ^ "United States Patent 4840714". Archived from the original on 2007-09-29. Retrieved 2007-05-24.

외부 링크