엠베로이드

Embryoid body
text
서스펜션 배양액에서 EB의 위상 이미지.개별 EB는 약 1000 mESC로 구성된다.
세포가 강화된 녹색 형광 단백질-발현성 단백질-자생적으로 심장근육세포들을 박동하는 것으로 분화된 발생성 몸체.

발생체(EB)는 전능 줄기세포의 3차원 집합체다.

EB는 인간 배아줄기세포를 세 개의 배아 세균층을 위태롭게 하는 발생성 체로 분화하는 것이다.

배경

태아 체질을 구성하는 전지전능 세포 유형에는 쥐(mESC),[1][2] 영장류,[3] 인간(hESC)[4] 선원에서 배아의 배반세포 단계에서 파생된 배아줄기세포(ESC)가 있다.또한 EB는 체세포 핵이식이나[5][6][7] 유도 만능줄기세포(iPS)를 산출하기 위한 체세포 재프로그래밍 등 대체 기법을 통해 도출된 배아줄기세포로부터 형성될 수 있다.[8][9][10][11]모노레이어 형식으로 배양된 ESC와 유사하게, 발생체 내 ESC는 모든 체세포 유형을 구성하는 내막, 외막, 중막의 세 가지 세균 라인을 따라 분화와 세포 사양을 거친다.[12][13]

그러나, 모노레이어 문화와 대조적으로 ESCs Aggregate 시 형성되는 spheroid 구조는 EBs의 비독점적 문화를 중지하여 EB 문화를 본질적으로 확장 가능하게 하며, 이는 생물 처리 접근법에 유용하며, 잠재적인 임상 응용을 위해 많은 양의 세포가 생산될 수 있다.[14]또한 EBs는 크게 구별되는 세포 유형의 이질적인 패턴을 보이지만 ESC는 배아 발달을 직접 하는 유사한 단서에 대응할 수 있다.[15]따라서 EB 마이크로 환경 내에서 복잡한 세포 접착과 파라신 신호의 확립을 포함한 3차원 구조는 고유 조직 구조와 유사한 미세조직을 생성하는 분화와 형태생성을 가능하게 한다.[16]이러한 미세결과는 의약품 산업의 체외검사 및 배아발달 모델로서 재생의학 응용분야에서 손상되거나 병든 조직을 직간접적으로[15][17][18] 치료할 수 있을 것으로 기대된다.

포메이션

EB는 미분화 ESC에 고도로 표현되는 Ca2+ 종속 접착 분자 E-cadherin의 동음질 결합에 의해 형성된다.[19][20][21]반차별화 요인이 없는 상태에서 단일 세포로 배양되면 ESC는 자연적으로 집합하여 EB를 형성한다.[19][22][23][24]이러한 자발적 형성은 종종 배양 기질이 아닌 단일 세포 사이의 우선적 접착을 촉진하기 위해 접시를 한천 또는 친수성 고분자와 같은 비접착 물질로 코팅하는 벌크 서스펜션 문화에서 이루어진다.hESC는 단일 세포로 배양될 때 사멸을 겪기 때문에, EB 형성은 종종 작은 분자 Y-27632와[25] 2,4의 방부 티아졸(Tiazovivin/Tzv)을 포함한 rho 관련 키나제(ROCK) 경로의 억제제 사용이 필요하다.[26]또는 단일 세포로의 분리를 피하기 위해, EB는 hESC로부터 일관성 있는 군락(또는 군락 지역)의 수동 분리에 의해 형성되어 그 후에 중단상태에서 배양될 수 있다.보류 중인 EB의 형성은 대량의 EB의 형성에 순응할 수 있지만, 결과적인 골재의 크기에 대한 제어력을 거의 제공하지 못하여 종종 크고 불규칙한 형태의 EB로 이어진다.대안으로 혼합문화 플랫폼에 전달되는 유체역학력은 ESC가 대량정지 내에서 접종될 때 EB 크기의 동질성을 증가시킨다.[27]

또한 EB의 형성은 페트리 접시 뚜껑에 매달려 있는 한 방울(10-20µL)[21] 내에서 알려진 세포 밀도의 접종을 통해 보다 정밀하게 제어할 수 있다.이 방법은 드롭당 셀 수를 변경하여 EB 크기를 조절할 수 있지만, 교수형 드롭의 형성은 노동 집약적이며 확장 가능한 문화에 쉽게 순응할 수 없다.또한, 전통적인 교수형 드롭 형식에서는 미디어를 쉽게 교환할 수 없기 때문에 형성 2-3일 후에 교수형 드롭을 벌크 서스펜션 문화로 옮겨야 하며, 이 경우 개별 EB가 응집하는 경향이 있다.최근에는 변형된 교수형 드롭 형식 내에서 미디어 교류가 가능하도록 새로운 기술이 개발되고 있다.[28]또한 ESC를 개별 우물 내에 강제집합하거나 접착 기판에 국한하여 물리적으로 세포를 분리하는 기술도 개발되어 처리량 증가, EB의 제어형성 등이 가능해졌다.[29][30][31][32]궁극적으로, EB 형성에 사용되는 방법은 분화 궤적뿐만 아니라 집합 운동학, EB 크기 및 수율의 측면에서 EB 모집단의 이질성에 영향을 미칠 수 있다.[31][33][34]

EB 내 차별화

ESC 분화 프로토콜의 맥락 안에서, EB 형성은 세 가지 세균 선에 대한 자발적 분화를 개시하는 방법으로 자주 사용된다.EB 분화는 원시 내피 표현형을 향한 외부 세포의 사양에서 시작된다.[35][36]이후 외부 세포는 지하막의 구성과 구조와 유사한 [37][38]콜라겐 IV와 라미네인을 함유한 세포외 매트릭스(ECM)를 침전시킨다.ECM 증착에 대응하여 EB는 낭포성 공동체를 형성하는 경우가 많으며, 여기서 지하막과 접촉하는 세포는 생존할 수 있고 내부의 세포는 세포에 둘러싸인 유체가 채워진 공동이 된다.[39][40][41]이후 분화가 진행되어 세 가지 세균 계열의 파생 모델이 형성된다.보충제가 없는 경우 ESC의 "디폴트" 차별화는 주로 ectoderm과 그에 따른 신경계 라인화를 지향한다.[42]다만, 태아 소세럼 사용과 더불어 확정성장인자 첨가제 등 대체매체 구성은 중간재와 내분자 선에 대한 차별화를 촉진하기 위해 개발되었다.[43][44][45]

3차원 EB 구조의 결과, 상피 세포군 및 중피 세포군 모두의 외관, 상피-망상 전이(EMT)와 관련된 표지의 외관 등 EB 분화 중에 복합 형태생성이 발생한다.[46][47]또한, EBs에서 세포군 사이의 신호에 의한 유도 효과는 공간적으로 그리고 일시적으로 정의된 변화를 초래하여 복잡한 형태생성을 촉진한다.[48]발달한 배아에서 초기 혈관 구조를 연상시키는 혈액섬의 출현과 더불어, EBs가 p일 때 뉴런 확장(뉴런 조직의 의미)과 자발적 수축 활성(심장균 분화의 의미)의 패터닝 등, 조직과 같은 구조가 EBs 내에 전시되는 경우가 많다.젤라틴과 같은 접착성 기판에 붙인다.[13]보다 최근에는, EB 분화에 의해 시신 컵과 같은 구조물을 포함한 복잡한 구조물이 체외에서 생성되었다.[49]

배아 발육과 유사함

주요기사 : 발생발생

배아줄기세포 분화와 형태생식에 중심적인 연구의 많은 부분은 발달 생물학과 포유류 발생에 관한 연구에서 도출된다.[15]예를 들어, (ESC가 파생되는) 배반세포 발달 단계 직후 배아는 분화를 겪으며, 여기서 내부 세포 질량의 세포 사양에 의해 저모세포와 경피세포가 형성된다.[50]후에 이식 후 발달에서 전축과 후축이 형성되고 배아는 원시적인 줄기로 알려진 과도 구조를 발달시킨다.[51]원시행렬의 형성 및 이동 중에 발생하는 공간패터닝의 상당 부분은 Wnt 및 변환성장인자 β(TGFβ) 계열의 성장인자(Lefty 1, Nodal)와 같은 분자의 억제인자(Dkkk-1, S)를 포함한 다양한 세포군에 의한 작용제 및 길항제들의 분비에 기인한다.frp1, Sfrp5).[52][53][54]발생원인과 ESC 분화의 유사성 때문에, 동일한 성장 요인 중 다수가 지시된 분화 접근법의 중심이다.

게다가, EB문화의 발전 배아 organoids(Gastruloids)는 배아 development[55][56][57][58][59]에 symmetry-breaking,localised 단미증 표현, 배아 축(, 등에서 배에 이르는, 레프트-라이트는 전후 방향의)의 형성과gastrulation-like 이사 와 같은 놀라운 유사성을 보여 주의 발전을 가져왔다.ments.[55][56][57]

차별화를 이끌기 위한 과제

수용성 형태균과 세포외 미세환경을 정밀하고 균일하게 제어할 수 있는 단층문화에서의 ESC의 차별화와는 대조적으로, EBs의 3차원 구조는 방향화된 차별화에 도전장을 내민다.[16][60]예를 들어, EB의 외부를 형성하는 내장 내분자 집단은 촘촘하게 연결된 상피 세포와 밀도 높은 ECM으로 구성된 외부 "껍질"을 생성한다.[61][62]그러한 물리적 제한으로 인해 EB 크기와 결합하여 EB 내에서 이동 제한이 발생하여 형태균, 대사물, 영양소의 구배가 생성된다.[60]직경 약 300µm 이상의 셀 골재에서 산소 운반이 제한되는 것으로 추정되었지만,[63] 그러한 구배 개발은 분자 크기와 셀 흡수율에도 영향을 받는다.따라서, EBs에 형태균을 전달하면 단일 배양균에 비해 이질성이 증가하고 차별화된 세포 집단의 효율이 저하된다.EBs 내의 전송 제한을 해결하는 한 가지 방법은 EB 구조 내에서부터 형태균의 고분자 전달을 통해서이다.[61][64][65]또한, EB는 개별 마이크로티스로 배양될 수 있으며, 이후 조직 공학 용도를 위해 더 큰 구조로 조립될 수 있다.[66]비록 3차원 접착과 신호로 인한 복잡성은 더 많은 자연 조직 구조를 재점검할 수 있지만,[67][68] 그것은 또한 결과 세포 표현형과 형태생식에 대한 기계적, 화학적, 물리적 신호의 상대적 기여를 이해하는데 어려움을 야기한다.

참고 항목

참조

  1. ^ Martin, G. R. (1981). "Isolation of a pluripotent cell line from early mouse embryos cultured in medium conditioned by teratocarcinoma stem cells". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 78 (12): 7634–7638. Bibcode:1981PNAS...78.7634M. doi:10.1073/pnas.78.12.7634. PMC 349323. PMID 6950406.
  2. ^ Evans, M. J.; Kaufman, M. H. (1981). "Establishment in culture of pluripotential cells from mouse embryos". Nature. 292 (5819): 154–156. Bibcode:1981Natur.292..154E. doi:10.1038/292154a0. PMID 7242681. S2CID 4256553.
  3. ^ Thomson, J. A.; Kalishman, J.; Golos, T. G.; Durning, M.; Harris, C. P.; Becker, R. A.; Hearn, J. P. (1995). "Isolation of a primate embryonic stem cell line". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 92 (17): 7844–7848. Bibcode:1995PNAS...92.7844T. doi:10.1073/pnas.92.17.7844. PMC 41242. PMID 7544005.
  4. ^ Thomson, J. A.; Itskovitz-Eldor, J.; Shapiro, S. S.; Waknitz, M. A.; Swiergiel, J. J.; Marshall, V. S.; Jones, J. M. (1998). "Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts". Science. 282 (5391): 1145–1147. Bibcode:1998Sci...282.1145T. doi:10.1126/science.282.5391.1145. PMID 9804556.
  5. ^ Briggs, R.; King, T. J. (1952). "Transplantation of Living Nuclei from Blastula Cells into Enucleated Frogs' Eggs". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 38 (5): 455–463. Bibcode:1952PNAS...38..455B. doi:10.1073/pnas.38.5.455. PMC 1063586. PMID 16589125.
  6. ^ Wilmut, I.; Schnieke, A. E.; McWhir, J.; Kind, A. J.; Campbell, K. H. S. (1997). "Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells". Nature. 385 (6619): 810–813. Bibcode:1997Natur.385..810W. doi:10.1038/385810a0. PMID 9039911. S2CID 4260518.
  7. ^ Munsie, M. J.; Michalska, A. E.; O'Brien, C. M.; Trounson, A. O.; Pera, M. F.; Mountford, P. S. (2000). "Isolation of pluripotent embryonic stem cells from reprogrammed adult mouse somatic cell nuclei". Current Biology. 10 (16): 989–992. doi:10.1016/s0960-9822(00)00648-5. PMID 10985386.
  8. ^ Takahashi, K.; Yamanaka, S. (2006). "Induction of Pluripotent Stem Cells from Mouse Embryonic and Adult Fibroblast Cultures by Defined Factors". Cell. 126 (4): 663–76. doi:10.1016/j.cell.2006.07.024. hdl:2433/159777. PMID 16904174. S2CID 1565219.
  9. ^ Takahashi, K.; Tanabe, K.; Ohnuki, M.; Narita, M.; Ichisaka, T.; Tomoda, K.; Yamanaka, S. (2007). "Induction of Pluripotent Stem Cells from Adult Human Fibroblasts by Defined Factors". Cell. 131 (5): 861–872. doi:10.1016/j.cell.2007.11.019. hdl:2433/49782. PMID 18035408. S2CID 8531539.
  10. ^ Yu, J.; Vodyanik, M. A.; Smuga-Otto, K.; Antosiewicz-Bourget, J.; Frane, J. L.; Tian, S.; Nie, J.; Jonsdottir, G. A.; Ruotti, V.; Stewart, R.; Slukvin, I. I.; Thomson, J. A. (2007). "Induced Pluripotent Stem Cell Lines Derived from Human Somatic Cells". Science. 318 (5858): 1917–1920. Bibcode:2007Sci...318.1917Y. doi:10.1126/science.1151526. PMID 18029452. S2CID 86129154.
  11. ^ Park, I. H.; Arora, N.; Huo, H.; Maherali, N.; Ahfeldt, T.; Shimamura, A.; Lensch, M. W.; Cowan, C.; Hochedlinger, K.; Daley, G. Q. (2008). "Disease-Specific Induced Pluripotent Stem Cells". Cell. 134 (5): 877–886. doi:10.1016/j.cell.2008.07.041. PMC 2633781. PMID 18691744.
  12. ^ Itskovitz-Eldor, J.; Schuldiner, M.; Karsenti, D.; Eden, A.; Yanuka, O.; Amit, M.; Soreq, H.; Benvenisty, N. (2000). "Differentiation of human embryonic stem cells into embryoid bodies compromising the three embryonic germ layers". Molecular Medicine (Cambridge, Mass.). 6 (2): 88–95. PMC 1949933. PMID 10859025.
  13. ^ a b Doetschman, T. C.; Eistetter, H.; Katz, M.; Schmidt, W.; Kemler, R. (1985). "The in vitro development of blastocyst-derived embryonic stem cell lines: Formation of visceral yolk sac, blood islands and myocardium". Journal of Embryology and Experimental Morphology. 87: 27–45. PMID 3897439.
  14. ^ Dang, S. M.; Gerecht-Nir, S.; Chen, J.; Itskovitz-Eldor, J.; Zandstra, P. W. (2004). "Controlled, Scalable Embryonic Stem Cell Differentiation Culture". Stem Cells. 22 (3): 275–282. doi:10.1634/stemcells.22-3-275. PMID 15153605.
  15. ^ a b c Murry, C. E.; Keller, G. (2008). "Differentiation of Embryonic Stem Cells to Clinically Relevant Populations: Lessons from Embryonic Development". Cell. 132 (4): 661–680. doi:10.1016/j.cell.2008.02.008. PMID 18295582.
  16. ^ a b Bratt-Leal, A. S. M.; Carpenedo, R. L.; McDevitt, T. C. (2009). "Engineering the embryoid body microenvironment to direct embryonic stem cell differentiation". Biotechnology Progress. 25 (1): 43–51. doi:10.1002/btpr.139. PMC 2693014. PMID 19198003.
  17. ^ Nair, R.; Shukla, S.; McDevitt, T. C. (2008). "Acellular matrices derived from differentiating embryonic stem cells". Journal of Biomedical Materials Research Part A. 87A (4): 1075–1085. doi:10.1002/jbm.a.31851. PMID 18260134.
  18. ^ Baraniak, P. R.; McDevitt, T. C. (2010). "Stem cell paracrine actions and tissue regeneration". Regenerative Medicine. 5 (1): 121–143. doi:10.2217/rme.09.74. PMC 2833273. PMID 20017699.
  19. ^ a b Kurosawa, H. (2007). "Methods for inducing embryoid body formation: In vitro differentiation system of embryonic stem cells". Journal of Bioscience and Bioengineering. 103 (5): 389–398. doi:10.1263/jbb.103.389. PMID 17609152.
  20. ^ Larue, L.; Antos, C.; Butz, S.; Huber, O.; Delmas, V.; Dominis, M.; Kemler, R. (1996). "A role for cadherins in tissue formation". Development. 122 (10): 3185–3194. doi:10.1242/dev.122.10.3185. PMID 8898231.
  21. ^ a b Yoon, B. S.; Yoo, S. J.; Lee, J. E.; You, S.; Lee, H. T.; Yoon, H. S. (2006). "Enhanced differentiation of human embryonic stem cells into cardiomyocytes by combining hanging drop culture and 5-azacytidine treatment". Differentiation. 74 (4): 149–159. doi:10.1111/j.1432-0436.2006.00063.x. PMID 16683985.
  22. ^ Park, J. H.; Kim, S. J.; Oh, E. J.; Moon, S. Y.; Roh, S. I.; Kim, C. G.; Yoon, H. S. (2003). "Establishment and Maintenance of Human Embryonic Stem Cells on STO, a Permanently Growing Cell Line". Biology of Reproduction. 69 (6): 2007–2014. doi:10.1095/biolreprod.103.017467. PMID 12930726.
  23. ^ Williams, R. L.; Hilton, D. J.; Pease, S.; Willson, T. A.; Stewart, C. L.; Gearing, D. P.; Wagner, E. F.; Metcalf, D.; Nicola, N. A.; Gough, N. M. (1988). "Myeloid leukaemia inhibitory factor maintains the developmental potential of embryonic stem cells". Nature. 336 (6200): 684–687. Bibcode:1988Natur.336..684W. doi:10.1038/336684a0. PMID 3143916. S2CID 4346252.
  24. ^ Ludwig, T. E.; Levenstein, M. E.; Jones, J. M.; Berggren, W. T.; Mitchen, E. R.; Frane, J. L.; Crandall, L. J.; Daigh, C. A.; Conard, K. R.; Piekarczyk, M. S.; Llanas, R. A.; Thomson, J. A. (2006). "Derivation of human embryonic stem cells in defined conditions". Nature Biotechnology. 24 (2): 185–187. doi:10.1038/nbt1177. PMID 16388305. S2CID 11484871.
  25. ^ Watanabe, K.; Ueno, M.; Kamiya, D.; Nishiyama, A.; Matsumura, M.; Wataya, T.; Takahashi, J. B.; Nishikawa, S.; Nishikawa, S. I.; Muguruma, K.; Sasai, Y. (2007). "A ROCK inhibitor permits survival of dissociated human embryonic stem cells". Nature Biotechnology. 25 (6): 681–686. doi:10.1038/nbt1310. PMID 17529971. S2CID 8213725.
  26. ^ Xu, Y.; Zhu, X.; Hahm, H. S.; Wei, W.; Hao, E.; Hayek, A.; Ding, S. (2010). "Revealing a core signaling regulatory mechanism for pluripotent stem cell survival and self-renewal by small molecules". Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (18): 8129–8134. Bibcode:2010PNAS..107.8129X. doi:10.1073/pnas.1002024107. PMC 2889586. PMID 20406903.
  27. ^ Carpenedo, R. L.; Sargent, C. Y.; McDevitt, T. C. (2007). "Rotary Suspension Culture Enhances the Efficiency, Yield, and Homogeneity of Embryoid Body Differentiation". Stem Cells. 25 (9): 2224–2234. doi:10.1634/stemcells.2006-0523. PMID 17585171. S2CID 25461651.
  28. ^ Tung, Y. C.; Hsiao, A. Y.; Allen, S. G.; Torisawa, Y. S.; Ho, M.; Takayama, S. (2011). "High-throughput 3D spheroid culture and drug testing using a 384 hanging drop array". The Analyst. 136 (3): 473–478. Bibcode:2011Ana...136..473T. doi:10.1039/c0an00609b. PMC 7454010. PMID 20967331. S2CID 35415772.
  29. ^ Park, J.; Cho, C. H.; Parashurama, N.; Li, Y.; Berthiaume, F. O.; Toner, M.; Tilles, A. W.; Yarmush, M. L. (2007). "Microfabrication-based modulation of embryonic stem cell differentiation". Lab on a Chip. 7 (8): 1018–1028. doi:10.1039/b704739h. PMID 17653344.
  30. ^ Mohr, J. C.; De Pablo, J. J.; Palecek, S. P. (2006). "3-D microwell culture of human embryonic stem cells". Biomaterials. 27 (36): 6032–6042. doi:10.1016/j.biomaterials.2006.07.012. PMID 16884768.
  31. ^ a b Hwang, Y. -S.; Chung, B. G.; Ortmann, D.; Hattori, N.; Moeller, H. -C.; Khademhosseini, A. (2009). "Microwell-mediated control of embryoid body size regulates embryonic stem cell fate via differential expression of WNT5a and WNT11". Proceedings of the National Academy of Sciences. 106 (40): 16978–16983. Bibcode:2009PNAS..10616978H. doi:10.1073/pnas.0905550106. PMC 2761314. PMID 19805103.
  32. ^ Ungrin, M. D.; Joshi, C.; Nica, A.; Bauwens, C. L.; Zandstra, P. W. (2008). Callaerts, Patrick (ed.). "Reproducible, Ultra High-Throughput Formation of Multicellular Organization from Single Cell Suspension-Derived Human Embryonic Stem Cell Aggregates". PLOS ONE. 3 (2): e1565. Bibcode:2008PLoSO...3.1565U. doi:10.1371/journal.pone.0001565. PMC 2215775. PMID 18270562.
  33. ^ Sargent, C. Y.; Berguig, G. Y.; McDevitt, T. C. (2009). "Cardiomyogenic Differentiation of Embryoid Bodies is Promoted by Rotary Orbital Suspension Culture". Tissue Engineering Part A. 15 (2): 331–342. doi:10.1089/ten.tea.2008.0145. PMID 19193130.
  34. ^ Bauwens, C. L. L.; Peerani, R.; Niebruegge, S.; Woodhouse, K. A.; Kumacheva, E.; Husain, M.; Zandstra, P. W. (2008). "Control of Human Embryonic Stem Cell Colony and Aggregate Size Heterogeneity Influences Differentiation Trajectories". Stem Cells. 26 (9): 2300–2310. doi:10.1634/stemcells.2008-0183. PMID 18583540.
  35. ^ Chen, Y.; Li, X.; Eswarakumar, V. P.; Seger, R.; Lonai, P. (2000). "Fibroblast growth factor (FGF) signaling through PI 3-kinase and Akt/PKB is required for embryoid body differentiation". Oncogene. 19 (33): 3750–3756. doi:10.1038/sj.onc.1203726. PMID 10949929.
  36. ^ Esner, M.; Pachernik, J.; Hampl, A.; Dvorak, P. (2002). "Targeted disruption of fibroblast growth factor receptor-1 blocks maturation of visceral endoderm and cavitation in mouse embryoid bodies". The International Journal of Developmental Biology. 46 (6): 817–825. PMID 12382948.
  37. ^ Wan, Y. J.; Wu, T. C.; Chung, A. E.; Damjanov, I. (1984). "Monoclonal antibodies to laminin reveal the heterogeneity of basement membranes in the developing and adult mouse tissues". The Journal of Cell Biology. 98 (3): 971–979. doi:10.1083/jcb.98.3.971. PMC 2113154. PMID 6365932.
  38. ^ Li, X.; Chen, Y.; Schéele, S.; Arman, E.; Haffner-Krausz, R.; Ekblom, P.; Lonai, P. (2001). "Fibroblast growth factor signaling and basement membrane assembly are connected during epithelial morphogenesis of the embryoid body". The Journal of Cell Biology. 153 (4): 811–822. doi:10.1083/jcb.153.4.811. PMC 2192393. PMID 11352941.
  39. ^ Coucouvanis, E.; Martin, G. R. (1995). "Signals for death and survival: A two-step mechanism for cavitation in the vertebrate embryo". Cell. 83 (2): 279–287. doi:10.1016/0092-8674(95)90169-8. PMID 7585945.
  40. ^ Smyth, N.; Vatansever, H. S.; Murray, P.; Meyer, M.; Frie, C.; Paulsson, M.; Edgar, D. (1999). "Absence of basement membranes after targeting the LAMC1 gene results in embryonic lethality due to failure of endoderm differentiation". The Journal of Cell Biology. 144 (1): 151–160. doi:10.1083/jcb.144.1.151. PMC 2148127. PMID 9885251.
  41. ^ Murray, P.; Edgar, D. (2000). "Regulation of programmed cell death by basement membranes in embryonic development". The Journal of Cell Biology. 150 (5): 1215–1221. doi:10.1083/jcb.150.5.1215. PMC 2175256. PMID 10974008.
  42. ^ Ying, Q. L.; Smith, A. G. (2003). Defined conditions for neural commitment and differentiation. Methods in Enzymology. Vol. 365. pp. 327–341. doi:10.1016/s0076-6879(03)65023-8. ISBN 9780121822682. PMID 14696356.
  43. ^ Wiles, M. V.; Keller, G. (1991). "Multiple hematopoietic lineages develop from embryonic stem (ES) cells in culture". Development. 111 (2): 259–267. doi:10.1242/dev.111.2.259. PMID 1893864.
  44. ^ Purpura, K. A.; Morin, J.; Zandstra, P. W. (2008). "Analysis of the temporal and concentration-dependent effects of BMP-4, VEGF, and TPO on development of embryonic stem cell–derived mesoderm and blood progenitors in a defined, serum-free media". Experimental Hematology. 36 (9): 1186–1198. doi:10.1016/j.exphem.2008.04.003. PMID 18550259.
  45. ^ Nostro, M. C.; Cheng, X.; Keller, G. M.; Gadue, P. (2008). "Wnt, Activin, and BMP Signaling Regulate Distinct Stages in the Developmental Pathway from Embryonic Stem Cells to Blood". Cell Stem Cell. 2 (1): 60–71. doi:10.1016/j.stem.2007.10.011. PMC 2533280. PMID 18371422.
  46. ^ Ten Berge, D.; Koole, W.; Fuerer, C.; Fish, M.; Eroglu, E.; Nusse, R. (2008). "Wnt Signaling Mediates Self-Organization and Axis Formation in Embryoid Bodies". Cell Stem Cell. 3 (5): 508–518. doi:10.1016/j.stem.2008.09.013. PMC 2683270. PMID 18983966.
  47. ^ Shukla, S.; Nair, R.; Rolle, M. W.; Braun, K. R.; Chan, C. K.; Johnson, P. Y.; Wight, T. N.; McDevitt, T. C. (2009). "Synthesis and Organization of Hyaluronan and Versican by Embryonic Stem Cells Undergoing Embryoid Body Differentiation". Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 58 (4): 345–358. doi:10.1369/jhc.2009.954826. PMC 2842597. PMID 20026669.
  48. ^ Bauwens, C. L.; Song, H.; Thavandiran, N.; Ungrin, M.; Massé, S. P.; Nanthakumar, K.; Seguin, C.; Zandstra, P. W. (2011). "Geometric Control of Cardiomyogenic Induction in Human Pluripotent Stem Cells". Tissue Engineering Part A. 17 (15–16): 1901–1909. doi:10.1089/ten.TEA.2010.0563. hdl:1807/33799. PMID 21417693. S2CID 22010083.
  49. ^ Eiraku, M.; Takata, N.; Ishibashi, H.; Kawada, M.; Sakakura, E.; Okuda, S.; Sekiguchi, K.; Adachi, T.; Sasai, Y. (2011). "Self-organizing optic-cup morphogenesis in three-dimensional culture". Nature. 472 (7341): 51–56. Bibcode:2011Natur.472...51E. doi:10.1038/nature09941. PMID 21475194. S2CID 4421136.
  50. ^ Bielinska, M.; Narita, N.; Wilson, D. B. (1999). "Distinct roles for visceral endoderm during embryonic mouse development". The International Journal of Developmental Biology. 43 (3): 183–205. PMID 10410899.
  51. ^ Burdsal, C. A.; Damsky, C. H.; Pedersen, R. A. (1993). "The role of E-cadherin and integrins in mesoderm differentiation and migration at the mammalian primitive streak". Development. 118 (3): 829–844. doi:10.1242/dev.118.3.829. PMID 7521282.
  52. ^ Finley, K. R.; Tennessen, J.; Shawlot, W. (2003). "The mouse secreted frizzled-related protein 5 gene is expressed in the anterior visceral endoderm and foregut endoderm during early post-implantation development". Gene Expression Patterns. 3 (5): 681–684. doi:10.1016/s1567-133x(03)00091-7. PMID 12972006.
  53. ^ Kemp, C.; Willems, E.; Abdo, S.; Lambiv, L.; Leyns, L. (2005). "Expression of all Wnt genes and their secreted antagonists during mouse blastocyst and postimplantation development". Developmental Dynamics. 233 (3): 1064–1075. doi:10.1002/dvdy.20408. PMID 15880404. S2CID 20596850.
  54. ^ Rivera-Pérez, J. A.; Magnuson, T. (2005). "Primitive streak formation in mice is preceded by localized activation of Brachyury and Wnt3". Developmental Biology. 288 (2): 363–371. doi:10.1016/j.ydbio.2005.09.012. PMID 16289026.
  55. ^ a b Turner, David; Alonso-Crisostomo, Luz; Girgin, Mehmet; Baillie-Johnson, Peter; Glodowski, Cherise R.; Hayward, Penelope C.; Collignon, Jérôme; Gustavsen, Carsten; Serup, Palle (2017-01-31). "Gastruloids develop the three body axes in the absence of extraembryonic tissues and spatially localised signalling". bioRxiv 10.1101/104539.
  56. ^ a b Turner, David Andrew; Glodowski, Cherise R.; Luz, Alonso-Crisostomo; Baillie-Johnson, Peter; Hayward, Penny C.; Collignon, Jérôme; Gustavsen, Carsten; Serup, Palle; Schröter, Christian (2016-05-13). "Interactions between Nodal and Wnt signalling Drive Robust Symmetry Breaking and Axial Organisation in Gastruloids (Embryonic Organoids)". bioRxiv 10.1101/051722.
  57. ^ a b Baillie-Johnson, Peter; Brink, Susanne Carina van den; Balayo, Tina; Turner, David Andrew; Arias, Alfonso Martinez (2015-11-24). "Generation of Aggregates of Mouse Embryonic Stem Cells that Show Symmetry Breaking, Polarization and Emergent Collective Behaviour In Vitro". Journal of Visualized Experiments (105): e53252. doi:10.3791/53252. ISSN 1940-087X. PMC 4692741. PMID 26650833.
  58. ^ Brink, Susanne C. van den; Baillie-Johnson, Peter; Balayo, Tina; Hadjantonakis, Anna-Katerina; Nowotschin, Sonja; Turner, David A.; Arias, Alfonso Martinez (2014-11-15). "Symmetry breaking, germ layer specification and axial organisation in aggregates of mouse embryonic stem cells". Development. 141 (22): 4231–4242. doi:10.1242/dev.113001. ISSN 0950-1991. PMC 4302915. PMID 25371360.
  59. ^ Turner, David A.; Hayward, Penelope C.; Baillie-Johnson, Peter; Rué, Pau; Broome, Rebecca; Faunes, Fernando; Arias, Alfonso Martinez (2014-11-15). "Wnt/β-catenin and FGF signalling direct the specification and maintenance of a neuromesodermal axial progenitor in ensembles of mouse embryonic stem cells". Development. 141 (22): 4243–4253. doi:10.1242/dev.112979. ISSN 0950-1991. PMC 4302903. PMID 25371361.
  60. ^ a b Kinney, M. A.; Sargent, C. Y.; McDevitt, T. C. (2011). "The Multiparametric Effects of Hydrodynamic Environments on Stem Cell Culture". Tissue Engineering Part B: Reviews. 17 (4): 249–262. doi:10.1089/ten.TEB.2011.0040. PMC 3142632. PMID 21491967.
  61. ^ a b Carpenedo, R. L.; Bratt-Leal, A. S. M.; Marklein, R. A.; Seaman, S. A.; Bowen, N. J.; McDonald, J. F.; McDevitt, T. C. (2009). "Homogeneous and organized differentiation within embryoid bodies induced by microsphere-mediated delivery of small molecules". Biomaterials. 30 (13): 2507–2515. doi:10.1016/j.biomaterials.2009.01.007. PMC 2921510. PMID 19162317.
  62. ^ Sachlos, E.; Auguste, D. T. (2008). "Embryoid body morphology influences diffusive transport of inductive biochemicals: A strategy for stem cell differentiation". Biomaterials. 29 (34): 4471–4480. doi:10.1016/j.biomaterials.2008.08.012. PMID 18793799.
  63. ^ Van Winkle, A. P.; Gates, I. D.; Kallos, M. S. (2012). "Mass Transfer Limitations in Embryoid Bodies during Human Embryonic Stem Cell Differentiation". Cells Tissues Organs. 196 (1): 34–47. doi:10.1159/000330691. PMID 22249133. S2CID 42754482.
  64. ^ Bratt-Leal, A. S. M.; Carpenedo, R. L.; Ungrin, M. D.; Zandstra, P. W.; McDevitt, T. C. (2011). "Incorporation of biomaterials in multicellular aggregates modulates pluripotent stem cell differentiation". Biomaterials. 32 (1): 48–56. doi:10.1016/j.biomaterials.2010.08.113. PMC 2987521. PMID 20864164.
  65. ^ Purpura, K. A.; Bratt-Leal, A. S. M.; Hammersmith, K. A.; McDevitt, T. C.; Zandstra, P. W. (2012). "Systematic engineering of 3D pluripotent stem cell niches to guide blood development". Biomaterials. 33 (5): 1271–1280. doi:10.1016/j.biomaterials.2011.10.051. PMC 4280365. PMID 22079776.
  66. ^ Bratt-Leal, A. S. M.; Kepple, K. L.; Carpenedo, R. L.; Cooke, M. T.; McDevitt, T. C. (2011). "Magnetic manipulation and spatial patterning of multi-cellular stem cell aggregates". Integrative Biology. 3 (12): 1224–1232. doi:10.1039/c1ib00064k. PMC 4633527. PMID 22076329.
  67. ^ Akins, R. E.; Rockwood, D.; Robinson, K. G.; Sandusky, D.; Rabolt, J.; Pizarro, C. (2010). "Three-Dimensional Culture Alters Primary Cardiac Cell Phenotype". Tissue Engineering Part A. 16 (2): 629–641. doi:10.1089/ten.tea.2009.0458. PMC 2813151. PMID 20001738.
  68. ^ Chang, T. T.; Hughes-Fulford, M. (2009). "Monolayer and Spheroid Culture of Human Liver Hepatocellular Carcinoma Cell Line Cells Demonstrate Distinct Global Gene Expression Patterns and Functional Phenotypes". Tissue Engineering Part A. 15 (3): 559–567. doi:10.1089/ten.tea.2007.0434. PMC 6468949. PMID 18724832.