라이슈만 얼룩

레이슈만의 얼룩이라고도 알려진 라이슈만 얼룩은 피를 얼룩지게 하는 데 현미경 검사에서 사용된다.일반적으로 백혈구, 말라리아 기생충, 트라이파노소마(trypanosomas)를 구별하고 식별하는데 사용된다."폴리크롬화" 메틸렌 블루(즉, 다양한 아지르로 데메틸화)와 에오신(Eosin)의 메타놀릭 혼합물을 기반으로 한다.메타놀 스톡 용액은 안정적이며 접두사 단계를 제거하여 얼룩을 직접 고정하는 용도도 제공한다.수성 완충제로 희석하여 작업용액을 만들면 결과 혼합물이 매우 불안정하여 오래 사용할 수 없다.Leishman 얼룩은 그것의 발명가인 스코틀랜드 병리학자 William Boog Leishman의 이름을 따서 지어졌다.로마노프스키 얼룩의 일종으로, 따라서 지엠사 얼룩, 제너의 얼룩, 라이트의 얼룩과 비슷하고 부분적으로 대체할 수 있다.

준비 및 보관

많은 회사들이 드라이 파우더 형태로 리슈만 스테인(Leishman Stain)을 판매하고 있는데, 이 분말은 나중에 메탄올과 함께 재조립된다.^[1]열과 밝은 빛은 얼룩을 산화시키고 메틸렌 바이올렛(Bernthsen)이나 아즈레-에오신염과 같은 불용성 침전물의 침전을 유발한다.^[2]

장단점

이 섹션은 위키백과 편집자의 개인적인 감정을 진술하거나 주제에 대한 원론적인 주장을 제시하는 개인적인 성찰, 개인적인 에세이 또는 논쟁적인 에세이처럼 쓰여진다. 백과사전 스타일로 다시 써서 개선하는데 도움을 주길 바란다.(2019년 1월) (이 템플릿 메시지를 제거하는 방법과 시기 알아보기)

이점

존 비비안 데이키 경의 교과서인 실용 해혈학에 따르면, "현재 사용되고 있는 로마노프스키 얼룩들 중에서 제너는 가장 단순하고 지엠사는 가장 복잡하다.중간 위치를 차지하는 레이쉬만의 얼룩은 여전히 일상적인 얼룩에 널리 사용되고 있다."

WHO 프로토콜은 다음을 언급한다.

이러한 염료에는 얼룩 특성이 다른 여러 가지 조합이 있다.5월-그룬왈드-젬사는 일상적인 일에 좋은 방법이다.라이트의 얼룩이 더 간단한 방법인 반면, 라이쉬만의 얼룩은 특히 얼룩진 피막이 긴급히 필요하거나 일상적인 얼룩이 없을 때(예: 야간에) 적합한 간단한 방법이다.필드의 얼룩은 말라리아 기생충을 위해 주로 얇은 막에 사용되는 급속한 얼룩이다.어떤 방법을 사용하든 다른 염료나 금속 염분에 오염되지 않은 염료를 선택하는 것이 중요하다.

런던의 윌리엄 부그 레이쉬만 경과 독일의 칼 로이터는 1901년에 독립적으로 "아마도 말라코프스키 얼룩의 가장 실용적인 변형"^[4]이라고 여겨지는 것을 발견했다.그들은 말라코프스키와 제너가 개발한 얼룩의 가장 좋은 면, 즉, 그들은 폴리크롬 메틸렌 블루(이름을 얻은 로마노프스키가 우연히 행한 것, 로마노프스키 이전에도 에른스트 말라코프스키가 조직적으로 행한 것, 그리고 베른하르트 노히트가 재발견한 것, 그러나 제너, 메이, 그룬왈드, 그리고 단순하게 사용한 많은 다른 면들을 사용했다.메틸렌 블루)와 여과된 아즈레 에오세인트는 수성 혼합물에서 침전되어 알코올 용매(제너의 지혜)로 재분해된다.레이슈만의 방법과 로이터의 방법의 차이는 다음과 같았다.레이슈만은 (제너와 마찬가지로) 메탄올을 사용했고, 에오신 B를 에오신 Y로 대체한 반면, 로이터는 에틸알코올을 사용하며 절대 순수 용매의 사용의 중요성을 올바르게 강조했다.두 방법 모두 안정된 얼룩과 원하는 보라색을 생성했다.

좋은 대비

라이슈만 얼룩은 일반적으로 핵의 화려한 보라색 색상과 중성미자 과립을 보여주는데, 이는 미분수가 편리해지고 세포질과 핵 사이의 대비를 충분히 만들어내지 못하는 단순한 메틸렌 파랑과 에오신 바탕의 얼룩보다 얼룩의 질을 더 좋게 한다.레이쉬먼은 다른 로마노프스키 얼룩과 마찬가지로 세포질 디테일과 과립을 더 잘 얼룩지게 하기 때문에 혈액학자들은 일반적으로 그것들을 선호한다(그러나 아래에서는 세포학자에 대해 살펴본다).ICSH 기준 방법에서 사용되는 값비싸고 독성이 강한 순수 합성 AZure B 및 Eosin Y 기반 시약에 비해 산화가 되어 결국 세포질에 최적의 푸른색 대신 회색 톤을 주는 단점도 자유롭지 못한 것과 비교하면 레이쉬만은 저렴하고 실행하기 쉬운 기법이다.허용 가능한 ^{[citation needed]}대비

말라리아 기생충에 대한 좋은 민감도

레이쉬만 얼룩은 필드의 얼룩보다 민감하고 말라리아 기생충을 검출하는 형광 얼룩만큼 좋다는 것이 기록되어 있다.^[5]

단점들

어금니 비율 조절 어려움

에오신과 혼합된 폴리크롬 메틸렌 블루의 구성은 지엠사 타입의 얼룩에서 직접 무게와 혼합 비율만큼 결코 훌륭하지 않다.1890년^[6] 앨버트 플레안은 기본 염료와 산성 염료의 어금니 비율을 2:1에서 3:1로 늘려야 한다는 것을 알아냈으나, 제너스 시간(1899년)부터 아즈레 에오신테 크리스탈의 사용은 그 비율을 만족스럽지 못한 2:1로 되돌렸고 색의 깊이는 낮아졌다.다시 이 두 가지 성분의 비율을 수동으로 조절하여 다시 한 번 깊이를 되찾게 한 것은 구스타프 기엠사와 그와 같은 사람들의 작품뿐이었다.그러나 그 비율을 인위적으로 조절한 Giemsa와 다른 사람들은 다른 극단(Azure의 큰 어금니가 16.1까지의 비율까지 초과함)으로 가는 경우가 있는데, 이것은 아마도 불필요했을 것이다. ICSH 당 최적 비율은 6.5 대 7.3이다.^[7]

불안정

버퍼로 재구성할 경우 라이프만 얼룩이 매우 불안정해지고(글리세롤로 인해 상대적으로 안정성이 높은 지엠사 또는 6:4 v/v 비율에서 메탄올+DMSO를 사용하는 ICSH 기준 얼룩과 대조적으로) 침전되기 시작하며 반복 필터링이 필요하다.세심하게 관리하지 않으면, 물 흡수, 열린 용기에서 나오는 메탄올 증발, 반복적인 여과 등이 구성의 변화를 일으키고 잦은 변화가 필요하며 이 방법을 낭비하게 된다.여과되지 않으면 얼룩에 침전물이 혈소판과 혼동될 수 있다.사용하기 전에 얼룩 병을 흔들지 않는 것이 중요하다. 그렇지 않으면 침전물이 다시 멈추게 되고 얼룩질 때 필름에 침전되어 수많은 유물을 발생시키고 현미경을 매우 어렵게 만든다.^{[citation needed]}

세포질 대비는 좋지만 핵 대비는 H&E만큼 좋지 않다.

다른 모든 말라코프스키-로마노프스키-젬사 방식과 마찬가지로 시간이 흐르면서 퇴색되고 오랫동안 안정적으로 보관될 수 없다.또한 위와 같은 상대적 요소들은 핵에 짙은 보라색을 얼룩지게 하고 핵 특징의 세부 사항들은 헤마톡실렌이나 에오신처럼 명확하지 않아 일부 세포학자들이 선호한다.그러나 그렇게 하면 (H&E 얼룩보다 세포질 디테일 과립 등을 더 잘 얼룩지게 하기 때문에) 보완적인 방법이다.^{[citation needed]}

참조