G418

G418
G418
G418.svg
이름
우선 IUPAC 이름
(2R,3S,4R,5R,6S)-5-아미노-6-{(1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-디아미노-3-{(2R,3R,4R,5R)-3,5-5-5-히드록시메틸
기타 이름
유전인
O-2-아미노-2,7-디데스옥시-D-글리세로-α-D-글루코-헵토피라노실-(1→4)-O-(3-데스옥시-4-C-메틸-3-(메틸아미노)-β-L-아라보피라노실(1→6)-REPTAMIN
식별자
3D 모델(JSmol)
첸블
켐스파이더
드러그뱅크
유니
  • InChI=1S/C20H40N4O10/c1-6(25)14-11(27)10(26)9(23)18(32-14)33-15-7(21)4-8(22)16(12)34-19-13(243-2)31
    키: BRZYSWJRSDMWLG-NQRKCNNJSA-N checkY
  • InChI=1/C20H40N4O10/c1-6(25)14-11(27)10(26)9(23)18(32-14)33-15-7(21)4-8(22)16(12)34-19-13)17(24)20-2,305-31)
    키: BRZYSWJRSDMWLG-NQRKCNNJBI
  • O[C@H]3[C@H](O)[C@H](N)[C@H](O[C@H]2[C@H](N)C[C@H](N)[C@H][C@H][1]OC[C@](C)(O)[C@H](NC)[C@H]1O][C@H]2O)OC3[C@@H](O)C
특성.
C20H40N4O10
몰 질량 496.558 g/g−1/g
50 mg/mL
달리 명시되지 않은 한 표준 상태(25°C[77°F], 100kPa)의 재료에 대한 데이터가 제공됩니다.

G418(제네티신)은 겐타마이신 B1과 구조가 유사한 아미노글리코시드 항생제이다.그것은 Micromonospora rhodorangea에 [1]의해 생산된다.G418은 원핵세포와 [1]진핵세포의 신장단계를 억제함으로써 폴리펩타이드 합성을 차단한다.G418에 대한 내성은 아미노글리코시드3'-[1]포스포스포트랜스퍼라아제를 코드하는 Tn5로부터의 네오유전자에 의해 부여되며, G418은 네오마이신황산염의 유사체이며, 네오마이신과 유사한 메커니즘을 가진다.G418은 유전자 조작 [2]세포를 선택하기 위해 실험실 연구에서 흔히 사용된다.일반적으로 5μg/mL 이하의 세균 및 조류 농도를 사용하며, 포유동물 세포 농도는 약 400μg/mL, 유지보수는 약 200μg/mL를 사용한다.그러나 포유동물 세포에서 내성 클론 선택을 위한 최적의 농도는 내성 유전자를 운반하는 플라스미드에 따라 사용되는 세포주뿐만 아니라 사용된 세포주에 따라 달라지므로 항생제 적정은 모든 실험 시스템에 대한 최상의 조건을 찾기 위해 이루어져야 한다.적정은 100 μg/mL에서 1400 μg/mL까지의 항생제 농도로 실시한다.저항성 클론 선택에는 1주에서 최대 3주가 소요될 수 있습니다.

G418 불순물 프로파일

G418은 발효분리공정에 의해 제조되며, G418은 G418을 제조하면서 다른 많은 겐타미신을 생산한다.G418의 일반적인 불순물로는 겐타마이신 A, C1, C1a, C2, C2a 및 [3]X2가 있다.G418의 품질은 단순히 효력뿐만 아니라 민감 세포와 저항 세포의 킬링 곡선에 의해 정의된 선택성에 기초한다.좋은 G418 제품은 민감 세포(예: NIH 3T3)의 LD가 가장 낮고50 내성 세포(예: 내성 유전자에 의해 트랜스펙트된 NIH 3T3)의 LD가 가장 높다50.젠타마이신은 젠타마이신 [4]X2를 제외하고는 거의 선택성이 없다.

세포생물학에서 사용

G418은 세포 배양 셋업에서 선택적 약제로서 일상적으로 사용된다.연구자들은 neoR 선택 저항 유전자와 그들의 벡터를 연결할 수 있다.만약 벡터가 세포에 성공적으로 도입된다면, 세포는 G418 내성 세포가 될 수 있다.G418로 처리한 후, 이러한 벡터(-) 세포는 죽는 반면 벡터(+) 세포는 살아남는다.이 방법은 연구자들이 벡터(+)[1][5] 세포를 선택하는데 도움을 줄 수 있다.

레퍼런스

  1. ^ a b c d "Geneticin". Thermo Fisher Scientific.
  2. ^ "G418". labome.com. Archived from the original on 2009-12-29. Retrieved 2010-01-09.
  3. ^ G418 불순물 프로파일
  4. ^ G418 선택성
  5. ^ Harvey Lodish; et al. (2013). "Chapter5: Molecular Genetic Techniques". Molecular Cell Biology (7th edition). Macmillan Higher Education. pp. 171–223. ISBN 978-1-4641-0981-2.