니트로체핀

Nitrocefin
니트로체핀
Nitrocefin.svg
식별자
  • (6R,7R)-3-[(E)-2-(2,4-디니트로페닐)에테닐]-
    8-oxo-7-[(2-thiophen-2-ylacetyl)amino]-
    5-thia-1-azabyclo[4.2.0]oct-2-ene-
    2-제곱실산
CAS 번호
펍켐 CID
켐스파이더
유니
켐벨
ECHA InfoCard100.164.734 Edit this at Wikidata
화학 및 물리적 데이터
공식C21H16N4O8S2
어금질량516.50 g·190−1
3D 모델(JSmol)
  • O=C(Cc1cccs1)N[C@H]1C(=O)N2C(=O)=C(/C=C/c3cc([N+])[O-]cc3[N+][O]])cc3[N+][O-]][O-])])CS[C@H]12
  • InChI=1S/C21H16N4O8S2/c26-16(9-14-2-1-7-34-14)22-17-19(27)23-18(21(28)29)12(10-35-20(17)23)4-3-11-5-6-13(24(30)31)8-15(11)25(32)33/h1-8,17,20H,9-10H2,(H,22,26)(H,28,29)/b4-3+/t17-,20-/m1/s1 checkY
  • 키:LHNIIDJCEOSHA-OQRUQUETBSA-N checkY
(iii)


니트로체핀은 다양한 미생물에 의해 생성되는 베타 락타마제 효소의 존재를 검출하기 위해 일상적으로 사용되는 색소생성 세두포린 기질이다.페니실린과 같은 베타락탐 항생제에 대한 베타락타마제 매개 저항성은 장내 그램 음성균의 주요 집단인 엔테오박테리아과(Enterobacteria과)를 포함한 다수의 박테리아에게 널리 퍼져 있는 저항의 메커니즘이다.PCR을 포함한 베타 락타마제 검출의 다른 방법들이 있지만 니트로체핀은 적은 재료와 저렴한 장비를 사용하여 빠른 베타 락타마제 검출이 가능하다.[1][2]

구조

세팔로스포린으로서 니트로체핀은 베타락타마제 매개 가수분해에 취약한 베타락탐 링을 함유하고 있다.일단 가수 분해되면 분해된 니트로체핀 화합물은 노란색에서 빨간색으로 빠르게 변한다.니트로체핀은 세팔로스포린으로 여겨지지만 항균 성질이 있는 것으로 보이지는 않는다.[1]

분해 및 크롬 발생 특성

온전한 베타락탐 항생제는 펩티도글리칸 합성에 관여하는 페니실린 결합 단백질(PBP)에 결합하여 작용한다.베타-락타마아제는 취약한 베타-락탐의 베타-락탐 링과 베타-락탐 하위 클래스 멤버(특정 세팔로스포린 포함)에서 카보닐 탄소와 질소 사이의 아미드 결합을 가수 분해한다.아미드 결합의 가수분해 후 항생제는 박테리아 PBP를 결합하는 능력이 부족하여 무용지물이 된다.이 과정의 시각적 감지는 대부분의 세팔로스포린에서 본질적으로 불가능하다. 왜냐하면 온전하고 가수 분해된 제품에서 자외선 흡수 이동은 가시 스펙트럼 바깥에서 발생하기 때문이다.그러나 니트로스핀을 가수분해하면 가시광선 스펙트럼 내 자외선 흡수량이 온전(노란색) 니트로스핀(약 380nm)에서 분해(빨간색) 니트로스핀(약 500nm)으로 변화하여 거시적 수준에서 베타 락타마제 활성을 시각적으로 검출할 수 있다.[1]

탐지 검사

다음 검사에서는 니트로체핀을 사용하여 값싼 재료와 장비를 사용하여 베타 락타마제 효소를 검출할 수 있는 방법을 설명한다.[3]니트로체핀의 작업용액은 0.5 mg/mL ~ 1.0 mg/mL이다.

슬라이드 표면 검사

  1. 깨끗한 유리 미끄럼틀 표면에 0.5 mg/ml의 니트로세핀을 한 방울 더 넣는다.
  2. 무균 루프를 사용하여 한천 표면에서 군집을 선택하고 드롭과 혼합하십시오.
  3. 20-30분 이내에 빨간색으로 표시됨베타-타마제 활성을 나타낸다.

직접 접촉 검사

  1. 0.5 mg/ml의 니트로스핀 한 방울을 직접 고립된 군집의 표면에 놓는다.
  2. 20-30분 이내에 빨간색으로 표시됨베타-타마제 활성을 나타낸다.

육수 서스펜션 검사

  1. 국물 서스펜션 1ml에 0.5mg/ml의 니트로체핀을 3-5방울 떨어뜨린다.
  2. 20-30분 이내에 빨간색으로 표시됨베타-타마제 활성을 나타낸다.

리세드 셀 어세이

  1. 소음에 의한 세포정지 1ml 입니다.
  2. 라이스 셀 서스펜션에 니트로세핀 0.5mg/ml를 3-5방울 떨어뜨린다.
  3. 20-30분 이내에 빨간색으로 표시됨베타-타마제 활성을 나타낸다.

용지 검사 필터링

  1. 깨끗한 페트리 접시 또는 다른 깨끗하고 격리된 표면에 여과지 작은 조각(약 3 x 3cm)을 넣고 0.5 mg/ml 니트로체핀으로 포화(3-5ml)시킨다.
  2. 격리된 군집을 선택하고 주입된 여과지 표면에 얼룩을 남긴다.
  3. 20-30분 이내에 빨간색으로 표시됨베타-타마제 활성을 나타냄

[4]

참고 항목

참조

  1. ^ a b c O'Callaghan CH, Morris A, Kirby SM, Shingler AH (April 1972). "Novel method for detection of beta-lactamases by using a chromogenic cephalosporin substrate". Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 1 (4): 283–8. doi:10.1128/AAC.1.4.283. PMC 444209. PMID 4208895.
  2. ^ Coudron PE, Moland ES, Sanders CC (October 1997). "Occurrence and detection of extended-spectrum beta-lactamases in members of the family Enterobacteriaceae at a veterans medical center: seek and you may find". Journal of Clinical Microbiology. 35 (10): 2593–7. doi:10.1128/jcm.35.10.2593-2597.1997. PMC 230016. PMID 9316913.
  3. ^ Parr TR, Pai CH, Bryan LE (July 1984). "Simple screening method for beta-lactamase-positive and -negative ampicillin-resistant Haemophilus influenzae isolates". Journal of Clinical Microbiology. 20 (1): 131–2. doi:10.1128/jcm.20.1.131-132.1984. PMC 271264. PMID 6378964.
  4. ^ "Nitrocefin Protocol" (PDF). TOKU-E.com. Archived from the original (PDF) on 17 April 2016.