마이크로 형광 측정

Microfluorimetry
디히드로에티듐을 함유한 조현당류 폼브

미세 형광 측정은 형광 분자로 태그된 이미지 세포 구성 요소에 현미경을 사용하여 세포의 생화학 및 생물물리학적 특성을 연구하기 위한 형광 측정의 적용이다.형광 측정의 질적 성질을 정량적으로 측정할 수 있는 마이크로 광도 측정의 일종이며, 따라서 이전에는 [1]육안으로는 식별할 수 없었던 최종 결과를 가능하게 한다.

사용하다

미세 형광 측정은 세포 생물학, 미생물학, 면역학, 세포 주기 분석 그리고 세포의 [2]"흐름 핵형식"을 포함한 많은 다른 분야에 사용됩니다.플로우 카로타이핑에서는 분리된 메타기 염색체를 플로우 마이크로 형광계로 염색하여 측정한다.염색체의 형광 염색은 또한 상대적인 발생 빈도와 측정된 염색체의 염색체 DNA 함량에 대한 분포를 제공할 수 있다.이 기술은 이전의 방법보다 더 빠른 속도로 핵형 입력을 가능하게 하며 중국 햄스터 [3]염색체를 사용하여 정확함을 보여주었다.또한 플로우 마이크로 형광 측정(FMF)을 사용하여 작은 세포 샘플을 가진 형광 마커를 사용하여 세포 집단을 결정할 수도 있습니다.플로우 마이크로 형광 측정에 사용되는 마커는 형광 항원 또는 DNA 결합제로 [2]구성됩니다.항원과 [1]반응하는 항체의 정확한 측정을 가능하게 한다.플로우 마이크로 형광 측정은 또한 약물 치료 [4]중 세포의 유형, 단백질과 DNA 발현, 세포 주기 및 기타 특성을 결정하기 위해 제약 연구에 사용됩니다.예를 들어, 미세 형광 측정은 개별 세포의 [5]칼슘 이온 농도와 미토콘드리아 막 전위에 대한 신경 독소의 영향을 비교하기 위해 뉴런에서 사용됩니다.또, 각 [6]세포의 DNA 함량을 분석·비교하는 것으로, 다른 미생물을 구별하는 방법으로도 이용할 수 있다.목적에 따라 다르며 현대 세포생물학과 [7]유전체학에서 중요한 기술인 적절한 형광 염료를 사용하여 세포 유형을 구별하는 데에도 동일한 개념이 적용될 수 있습니다.

마이크로 형광 측정의 또 다른 용도는 형광색소 분자의 방출과 보통 입자와 [8]세포로부터 데이터를 만들기 위한 광원으로 레이저를 사용하는 흐름 세포 측정법이다.그것은 매우 빠른 속도로 염색체를 분리하는데 사용될 수 있고 차세대 염기서열 분석과 함께 쉽게 사용될 수 있다.이 기술은 단순히 [9]관련된 염색체만 매우 빠른 속도로 분리함으로써 발생할 수 있다.예를 들어, 대장균 박테리오파지 람다와 T4는 이전에는 [10]어려웠던 게놈 분석을 가능하게 하는 흐름 세포측정법으로 분리할 수 있었다.

개념.

마이크로 형광 측정법은 확립된 형광 측정법에 기초하고 있다.대상 화합물의 존재 하에서 형광을 일으키는 염료를 사용하여 형광의 존재와 강도를 측정하여 화합물의 존재를 검출할 수 있습니다.또한 강도 차이를 이용하여 화합물의 농도를 결정할 수 있다.또한 염료가 스펙트럼 시프트를 거치면 염료의 농도에 대한 지식에 관계없이 목표물의 절대 농도를 결정할 수 있습니다.Fura-2는 칼슘 측정에 사용되는 형광 염료의 한 예이다.마이크로 형광 측정은 단세포 및 기타 현미경 [11]관심사를 분석할 수 있도록 측정에 현미경 성분을 추가함으로써 형광 측정을 확장합니다.

마이크로 형광계

마이크로 형광계는 현미경과 결합된 형광 분광 광도계로 현미경 샘플 또는 영역의 형광 스펙트럼을 측정하도록 설계되거나 현미경 샘플 영역의 투과 및 반사 스펙트럼을 측정하도록 구성할 수 있습니다.형광 현미경 전용으로 제작된 완전 마이크로 형광계 또는 현미경의 [12]광학 포트에 부착되는 형광 분광계 장치 중 하나입니다.마이크로 형광계를 사용하여 개별 세포 또는 염색체 내 화학 성분의 양과 분포를 추정할 수 있습니다.화학성분량을 추정하기 위해 광전자 측광법으로 형광강도를 측정하고 음염색체 중상판 [13]사진의 강도를 측정해 분포를 구한다.마이크로 스펙트럼 광도계는 투과율, 흡광도, 반사율 및 발광 스펙트럼을 측정할 수 있으며, 내장된 알고리즘을 사용하여 스펙트럼을 생성하여 조성, 농도 [12]등을 결정하기 위해 이전 데이터와 비교할 수 있다.

제한 사항

공정에는 많은 오차가 있지만 균질 시료를 준비할 수 없는 것과 같은 생물학적 오차가 기술적 [1]오류보다 한계일 가능성이 높습니다.

「 」를 참조해 주세요.

  • 형광 측정에 대한 완전한 논의를 위한 형광 분광학.
  • 형광계, 형광 측정용 장치에 대한 자세한 설명을 제공합니다.

레퍼런스

  1. ^ a b c Goldman, Morris (1971). "Microfluorimetry in the Antigenic Analysis of Closely Related Microorganisms". Annals of the New York Academy of Sciences. 177 (1): 439–45. Bibcode:1971NYASA.177..439G. doi:10.1111/j.1749-6632.1971.tb35073.x. PMID 4333753. S2CID 42391664.
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  5. ^ Limke, TL; Atchison, WD (Nov 2009). "Application of single-cell microfluorimetry to neurotoxicology assays". Current Protocols in Toxicology. 42 (1): 12.15.1–13. doi:10.1002/0471140856.tx1215s42. ISBN 978-0471140856. PMC 3201743. PMID 20960422.
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  12. ^ a b "Microspectrophotometer". microspectra.com. Craic Technologies. Retrieved 2012-10-25.
  13. ^ Barskiĭ, IIa; Ioffe, VA; Kudriavtsev, BN; Papaian, GV; Rozanov, IuM (1983). "Microfluorimeter for chromosome study". Tsitologiia. 25 (6): 711–8. PMID 6351388.

외부 링크

  • http://microspectra.com/component/content/article/52-craictech/81-microfluorometer, 마이크로 형광계
  • https://www.youtube.com/watch?v=_lmkEqTHj3Y, 마이크로 형광계 응용 비디오 설명
  • http://www5.pbrc.hawaii.edu/bln/ian/imaged_microfluorimetry.html, 마이크로 형광 측정 결과