플라크 감소 중화 시험

Plaque reduction neutralization test

플라크 감소 중화 시험은 바이러스에 대한 중화 항체의 계수를 정량화하는 데 사용된다.[1][2]

검사할 항체의 혈청 샘플이나 용액은 희석되어 바이러스 정지와 혼합된다. 이것은 항체가 바이러스와 반응할 수 있도록 배양된다. 이것은 합체된 숙주세포의 단열재 위에 쏟아진다. 세포층 표면은 아가르 또는 카르복시메틸 셀룰로오스 층으로 덮여 있어 바이러스가 무분별하게 퍼지는 것을 방지한다. 플라크 형성 단위의 농도는 며칠 후 형성된 플라크 수(감염된 세포의 영역)로 추정할 수 있다. 플라크 형성 단위는 바이러스에 따라 현미경 관찰, 형광 항체 또는 감염된 세포와 반응하는 특정 염료에 의해 측정된다.[3]

혈청 프리 바이러스에 비해 격자 수를 50% 줄이기 위한 혈청 농도를 통해 항체가 얼마나 존재하는지, 얼마나 효과적인지 측정해 준다. 이 측정치는 PRNT50 값으로 표시된다.

현재 많은 질병을 일으키는 바이러스를 중화시킬 수 있는 항체를 검출하고 측정하는 '금본위제'로 평가받고 있다.[4][5] 혈액응고법 등 다른 검사보다 민감도가 높고 특이성을 훼손하지 않는 상업적 효소 면역측정법도 많다. 더욱이 일부 아르보바이러스의 진단에는 다른 혈청학적 방법보다 구체적이다.

그러나 테스트는 빠른 결과(보통 몇 분에서 몇 시간)를 제공하는 EIA 키트에 비해 상대적으로 번거롭고 시간 집약적인(feew days)이다.

최근 확인된 이 검사의 문제는 항체의 중성화 능력이 검사에 사용되는 바이러스 성숙 상태와 세포 유형에 따라 결정된다는 것이다.[6] 따라서 검사에 잘못된 세포 라인을 사용하는 경우 항체가 실제로 그렇지 않을 때 중성화 능력을 갖는 것으로 보이거나, 반대로 중성화 능력을 실제로 가지고 있을 때 항체가 비효율적으로 보일 수 있다.[citation needed]

참고 항목

참조

  1. ^ Schmidt, N J; Dennis, J; Lennette, E H (July 1976). "Plaque reduction neutralization test for human cytomegalovirus based upon enhanced uptake of neutral red by virus-infected cells". Journal of Clinical Microbiology. 4 (1): 61–66. doi:10.1128/jcm.4.1.61-66.1976. ISSN 0095-1137. PMC 274391. PMID 182716.
  2. ^ Klasse, P. J. (2014-09-09). "Neutralization of Virus Infectivity by Antibodies: Old Problems in New Perspectives". Advances in Biology. 2014: 1–24. doi:10.1155/2014/157895. PMC 4835181. PMID 27099867.
  3. ^ Schmidt, N J; J Dennis; E H Lennette (July 1976). "Plaque reduction neutralization test for human cytomegalovirus based upon enhanced uptake of neutral red by virus-infected cells" (PDF). Journal of Clinical Microbiology. 4 (1): 61–66. doi:10.1128/jcm.4.1.61-66.1976. ISSN 0095-1137. PMC 274391. PMID 182716.
  4. ^ Thomas, Stephen J.; Ananda Nisalak; Kathryn B. Anderson; Daniel H. Libraty; Siripen Kalayanarooj; David W. Vaughn; Robert Putnak; Robert V. Gibbons; Richard Jarman; Timothy P. Endy (November 2009). "Dengue Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT) in Primary and Secondary Dengue Virus Infections: How Alterations in Assay Conditions Impact Performance". The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. 81 (5): 825–833. doi:10.4269/ajtmh.2009.08-0625. ISSN 0002-9637. PMC 2835862. PMID 19861618.
  5. ^ Ratnam, S; V Gadag; R West; J Burris; E Oates; F Stead; N Bouilianne (1995-04-01). "Comparison of commercial enzyme immunoassay kits with plaque reduction neutralization test for detection of measles virus antibody". J. Clin. Microbiol. 33 (4): 811–815. doi:10.1128/JCM.33.4.811-815.1995. PMC 228046. PMID 7790442.
  6. ^ Mukherjee, S.; Dowd, K. A.; Manhart, C. J.; Ledgerwood, J. E.; Durbin, A. P.; Whitehead, S. S.; Pierson, T. C. (2014). "Mechanism and Significance of Cell Type-Dependent Neutralization of Flaviviruses". Journal of Virology. 88 (13): 7210–7220. doi:10.1128/JVI.03690-13. ISSN 0022-538X. PMC 4054442. PMID 24741083.