뇌인

NeuN
NeuN(녹색), 미엘린 염기성 단백질(빨간색) 및 DNA(파란색)에 대한 항체로 얼룩진 쥐 해마.EnCor Biotechnology Inc.의 항체 및 이미지 제공.
녹색 성체 쥐 소뇌의 NeuN/Fox-3에 대한 항체 염색.Fox-3/NeuN 항체는 눈에 띄는 층을 형성하는 작은 소뇌 과립 세포 뉴런에 결합합니다.Fox-3/NeuN의 가까운 친척인 Fox-2 항체는 빨간색으로 표시되어 있다.Fox-2 항체는 NeuN/Fox-3 항체로 인식되지 않는 Purkinje 뉴런과 Golgi 세포를 염색한다.Purkinje 세포는 훨씬 더 풍부한 과립 세포 위에 층을 형성하고, 또한 Fox-2에는 양성이지만 NeuN/Fox-3에는 음성의 골지 세포도 과립 세포 층에서 볼 수 있습니다.DNA는 파란색으로 표시되어 있습니다.EnCor Biotechnology Inc.의 항체 및 이미지 제공.

뇌N(Fox-3, Rbfox3, 또는 헥사리보뉴클레오티드 결합단백질-3)은 케노하브디티스의 성결정 유전자의 단백질 생성물과 상동하는 단백질로 뉴런의 바이오마커로 일반적으로 사용되는 신경핵항원이다.

역사

NeuN은 1992년 [1]Mullen 등에 의해 처음 설명되었으며, Mullen 등은 이식 실험에 사용할 생쥐 종 고유의 면역학적 마커를 찾기 위해 생쥐 항원에 대한 일련의 모노클로널 항체를 키웠다.이 경우 mAb A60이라고 불리는 모노클로널 항체를 생성하는 하이브리드 도마주를 분리했다.이 항원은 신경핵에서만 발현되며 신경세포의 세포질 정도는 낮아져 모든 척추동물에게 효과가 있는 것으로 나타났다.따라서 이 항원은 "뉴로날 핵"에 대해 NeuN으로 알려졌지만 A60 항체가 무엇에 결합하는지는 이후 17년 동안 알려지지 않았다.2009년 Kim et al.NeuN이 Fox-3로 알려진 단백질, [2]Rbfox3로도 알려진 단백질, 선충 C. elegans의 유전학 연구에서 원래 확인된 단백질인 Fox-1의 포유류 상동성 단백질에 해당함을 보여주기 위해 단백질학 방법을 사용했다.

구조.

Western Blotting은 SDS-PAGE에서 mAb A60이 겉보기 분자량 ~46kDa와 ~48kDa의 두 밴드에 결합한다는 것을 보여준다.이 두 밴드는 번갈아 스플라이싱에 의해 단일 Fox-3 유전자에서 생성된다.사실 두 개의 [3]엑손에 의해 코드된 두 개의 아미노산 배열의 유무의 결과로서 Fox-3 유전자의 4개의 단백질 생성물이 있다.엑손12에서 47개의 아미노산이 포함되거나 없을 경우 SDS-PAGE 겔에서 볼 수 있는 ~46kDa 및 ~48kDa 대역이 생성되며, 엑손15에서 14개의 아미노산이 포함되거나 없을 경우 분자 크기가 너무 비슷하여 일반적인 SDS-PAGE 겔에서 식별되지 않는다.흥미롭게도 엑손15에 의해 코드된 단백질은 C-말단 PY형 핵국재배열을 추가하는데, 이는 NeuN/Fox-3 단백질이 핵일 수 있고, 일부 세포형에서는 세포질일 수도 있는 이유를 설명할 수 있다.모든 형태는 뉴런에서만 발현되기 때문에 mAb A60 항체와 NeuN/Fox-3에 대한 다른 유사한 항체는 뉴런의 강력한 마커로 매우 널리 사용되고 있다.

신경 바이오마커로 사용

NeuN 항체는 일부 단점에도 불구하고 뉴런 라벨링에 널리 쓰이고 있으며, 2018년 9월 'NeuN' 키워드를 사용한 Pubmed 검색 결과 3060건의 [4]조회수를 기록했다.소뇌의 푸르키네 세포, 성상 세포 및 골지 세포, 후각 승모 세포, 망막 광수용체 및 척수 감마 운동 뉴런과 같은 일부 신경 세포 유형은 NeuN 항체에 의해 인식되지 않는다.그러나 대부분의 뉴런은 강한 NeuN 양성이고, NeuN 면역반응은 조직 배양과 단면에서 뉴런을 식별하고 뇌 [5]영역의 뉴런/글리아 비율을 측정하기 위해 널리 사용되어 왔다.NeuN 면역반응은 뉴런이 성숙함에 따라, 전형적으로 뉴런 발달의 초기 단계에서 나타나는 지표인 Doublecortin의 낮은 발현을 가진 후에 명백해진다.

X 호몰로그의 여성화 로커스

Fox-3는 Fox-1 단백질의 포유동물 호몰로지 과 중 하나로,[6] 원래는 성 결정에 관여하는 유전자의 단백질 산물로 선충 C. elegans에서 발견되었다.사실 폭스는 "X의 여성화 궤적"의 줄임말이다.포유류의 게놈에는 C. 엘레건스 폭스-1과 상동하는 세 개의 유전자인 폭스-1, 폭스-2, 폭스-3가 포함되어 있다.Fox 단백질의 크기는 모두 46kDa이며, 각각의 단백질은 70개까지의 아미노산 RRM 또는 RNA 인식 모티브를 포함하고 있습니다.RRM 도메인은 인간 게놈에서 가장 흔한 것 중 하나이며 RNA 분자와 결합하는 수많은 단백질에서 발견됩니다.NeuN/Fox-3 및 다른 Fox 단백질은 mRNA 스플라이싱 조절에서 기능하며 특정 RNA 서열을 결합한다.Fox 계열의 단백질에 대한 리뷰는 이 [7]참조를 참조하십시오.Fox-3의 대체명칭은 Fox-2 및 Fox-1과 마찬가지로 Fox-3가 헥사리보뉴클레오티드 UGCAUG와 결합하기 때문에 헥사리보뉴클레오티드 결합단백질 3이며, 이 결합은 mRNA 스플라이싱 조절에 관여한다.

레퍼런스

2011년 6월 15일 현재 이 문서의 전체 또는 일부는엔코 바이오 테크놀로지 주식회사저작권자는 CC BY-SA 3.0 및 GFDL에 따라 재사용할 수 있도록 콘텐츠의 라이선스를 취득했습니다.모든 관련 조건을 준수해야 합니다.원본 텍스트는 "Fox3/NeuN에 대한 모노클로널 항체"였다.

  1. ^ Mullen, RJ; Buck, CR; Smith, AM (1992). "NeuN, a neuronal specific nuclear protein in vertebrates". Development. 116 (1): 201–11. doi:10.1242/dev.116.1.201. PMID 1483388.
  2. ^ Kim, KK; Adelstein, RS; Kawamoto, S (2009). "Identification of neuronal nuclei (NeuN) as Fox-3, a new member of the Fox-1 gene family of splicing factors". Journal of Biological Chemistry. 284 (45): 31052–61. doi:10.1074/jbc.M109.052969. PMC 2781505. PMID 19713214.
  3. ^ Dredge, BK; Jensen, KB (2011). "NeuN/Rbfox3 Nuclear and Cytoplasmic Isoforms Differentially Regulate Alternative Splicing and Nonsense-Mediated Decay of Rbfox2". PLOS One. 6 (6): e21585. Bibcode:2011PLoSO...621585D. doi:10.1371/journal.pone.0021585. PMC 3126832. PMID 21747913.
  4. ^ "NeuN - PubMed - NCBI".
  5. ^ Herculano-Houzel, S; Lent, R (2005). "Isotropic Fractionator: A Simple, Rapid Method for the Quantification of Total Cell and Neuron Numbers in the Brain". Journal of Neuroscience. 25 (10): 2518–21. doi:10.1523/JNEUROSCI.4526-04.2005. PMC 6725175. PMID 15758160.
  6. ^ Hodgkin, J; Zellan, JD; Albertson, DG (1994). "Identification of a candidate primary sex determination locus, fox-1, on the X chromosome of Caenorhabditis elegans". Development. 120 (12): 3681–9. doi:10.1242/dev.120.12.3681. PMID 7821230.
  7. ^ Underwood JG, Boutz PL, Dougherty JD, Stoilov P, Black DL (2005). "Homologues of the Caenorhabditis elegans Fox-1 protein are neuronal splicing regulators in mammals". Mol. Cell. Biol. 25 (22): 10005–10016. doi:10.1128/MCB.25.22.10005-10016.2005. PMC 1280273. PMID 16260614.