트립신화

Trypsinization

트립신화는 단백질을 분해하는 단백질 분해 효소인 트립신(trypsin)을 이용해 세포가 배양되고 있는 혈관으로부터 애독성 세포를 분리하는 과정이다.세포 배양액에 첨가되면 트립신은 세포가 혈관에 붙을 수 있는 단백질을 분해한다.트립신화는 종종 세포를 새로운 용기에 전달하는데 사용된다.트립신화 과정이 완료되면 셀이 정지하고 둥글게 나타난다.

실험 목적으로, 세포는 종종 플라스틱 플라스크나 판의 형태를 띠는 용기에 배양된다.그러한 플라스크에서는 세포에 증식에 필요한 필수 영양소로 구성된 성장 매체가 제공되며, 세포는 자라면서 용기와 서로 달라붙는다.

세포배양이나 조직배양의 이 과정은 세포를 용기와 서로 분리시키는 방법을 필요로 한다.소화관에서 흔히 발견되는 효소인 트립신은 용기와 세포 사이의 유착을 용이하게 하는 단백질을 '소화'하는 데 사용될 수 있다.

일단 세포가 용기에서 분리되면, 트립신이 합성되지 않는 한, 세포 표면 단백질도 시간이 지남에 따라 분해될 것이고 이것은 세포 기능에 영향을 줄 것이기 때문에 트립신을 비활성화할 필요가 있다.[1]트립신은 칼슘과 마그네슘과 같은 분열을 제공하는 세럼에 의해 억제되며, 이는 내부와 세포간 신호 전달 과정, 즉 CAM을 형성하는 과정에서 모두 역할을 하기 때문에 세럼은 보통 세포가 분리되면 용기에 추가된다 - 이것은 현미경으로 관찰하여 확인할 수 있다.

트립신화는 종종 세포가 새로운 용기로의 통과를 허용하거나, 실험을 위한 관찰을 하거나, 세포의 백분율을 제거함으로써 플라스크의 결합도를 감소시키기 위해 행해진다.

참조

  1. ^ Huang, H. L.; Hsing, H. W.; Lai, T. C.; Chen, Y. W.; Lee, T. R.; Chan, H. T.; Lyu, P. C.; Wu, C. L.; Lu, Y. C.; Lin, S. T.; Lin, C. W.; Lai, C. H.; Chang, H. T.; Chou, H. C.; Chan, H. L. (2010). "Trypsin-induced proteome alteration during cell subculture in mammalian cells". Journal of Biomedical Science. 17 (1): 36. doi:10.1186/1423-0127-17-36. PMC 2873939. PMID 20459778.