실드 회귀 분석

Schild regression
Linear fit.png
가상의 점에 적합한 직선 그래프.되돌릴 수 있는 경쟁적 길항제 실드 플롯은 직선이어야 하며, 직선 구배가 있어야 하며, Y 절절이 길항제 강도와 관련이 있어야 한다.

약리학에서 하인츠 오토 실드의 이름을 딴 실드 회귀 분석작용제나 길드 반응제 결합에 대한 작용제 및 길드제의 영향을 연구하는 도구다.null

용량-반응 곡선은 리간드 농도의 함수로 반응 또는 리간드 수용체 복합 형성을 설명하기 위해 구성할 수 있다.길항제들은 리간드의 수용체와 리간드의 상호작용을 억제하여 이러한 콤플렉스를 형성하는 것을 어렵게 한다.이는 선량 반응 곡선의 변화로 보인다(일반적으로 우측 이동 또는 최대 하강).가역적 경쟁적 길항제에서는 새로운 곡선이 이전 곡선과 평행하고 최대치가 변하지 않는 등 선량 반응 곡선에 우측 이동을 유발해야 한다.가역적 경쟁적 적대자들이 극복하기 어려운 적대자들이기 때문이다.우측 이동의 크기는 선량률 r로 정량화할 수 있다.선량 비율 r은 존재하는 길항제 의 반 최대 응답에 필요한 작용제 선량을 길항제 없는 반 최대 응답에 필요한 작용제("제어")로 나눈 비율이다.즉 억제된 곡선과 억제되지 않은 곡선의 EC50의 비율이다.따라서 r은 길항제 강도와 적용된 길항제 농도를 모두 나타낸다.가둠 방정식에서 도출된 방정식을 사용하여 다음과 같이 r을[] 와) 연관시킬 수 있다.

어디에

  • r은 선량 비율이다.
  • (는) 길항제 농도다.
  • 수용체에 대한 길항제 결합의 평형 상수다.

실드 플롯은 이중 로그 플롯으로, 일반적으로 ㎛ (- ))를 서수로, 을()로 기록한다.이것은 1을 뺀 후 이전 방정식의 양쪽의 base-10 로가리듬을 취함으로써 이루어진다.

이 방정식은 그래프를 쉽게 구성할 수 있도록 로그 10 [B ] \log _{}[{\에 대해 선형이다이것은 약리학에 컴퓨터를 사용하는 것이 널리 퍼지기 전에 특히 가치가 있었다.방정식의 y절은 의 음수 로그를 나타내며, 길항제 강도를 정량화하는 데 사용할 수 있다.null

이러한 실험은 약물의 고농도 등 대규모에 걸쳐 메커니즘이 다르기 때문에 매우 광범위한 범위(따라서 로그 스케일)에서 수행되어야 한다.[citation needed]null

Schild 그림을 관측 데이터 점에 적합시키는 작업은 회귀 분석을 통해 수행할 수 있다.null

리간드 바인딩에 대한 실드 회귀 분석

비록 대부분의 실험이 효과의 척도로 세포 반응을 사용하지만, 그 효과는 본질적으로 결합 운동학의 결과물이기 때문에 메커니즘을 설명하기 위해 리간드 결합을 사용한다.리간드 A는 평형 상수에 따라 수용체 R에 결합된다.

평형 상수가 더 의미 있지만, 텍스트에서 흔히 평형 상수의 역, 즉 친화 상수(Kaff = k1/k−1)를 언급하는 경우가 많다.바인딩이 더 좋다는 것은 바인딩 친화력의 증가를 의미한다.null

단일 균질 수용체에 대한 단순 리간드 결합 방정식은 다음과 같다.

[필요하다]

이것이 Hill-Langmuir 방정식인데, 실질적으로 작용제 결합에 대해 기술된 Hill 방정식이다.화학에서는 이러한 관계를 랭무어 방정식이라고 하는데, 이는 표면의 부위로 분자가 흡착되는 것을 기술한다(흡착 참조).null

결합 부지의 총 수로서, 방정식을 플로팅할 때 플롯의 경향이 있는 수평 점증상이다. 리간드 농도가 증가함에 따라 결합 부위가 더 많이 점유되지만 100% 점유되는 경우는 결코 없을 것이다.결합 친화력은 부지의 50%를 점유하는데 필요한 농도로, 이 값이 낮을수록 결합 부지를 점유하기가 쉽다.null

평형상태에서 리간드를 수용체에 결합하는 것은 결합 기질을 제품으로 변환하지 않고 정상상태에서 효소와 같은 운동학적(마이클리스-멘텐 방정식)을 따른다.null

리간드 결합에는 여러 가지 작용이 있을 수 있다.그들은 최대 결합 부위의 수, 리간드와 수용체의 친화력, 두 가지 효과를 함께 변화시킬 수 있으며, 연구 중인 시스템이 조직 샘플과 같이 더 온전할 때 더욱 기이한 효과를 얻을 수 있다.(현안 흡수, 감압, 기타 비균형 정상 상태가 문제가 될 수 있다.)null

극복할 수 있는 약물은 결합 친화력을 변화시킨다.

  • 경쟁 리간드: K = K 1+[
  • 협동알로스테리릭 리간드: = + [ ] B+ [ {\d}}\[clarification needed]

극복할 수 없는 약물은 최대 바인딩을 변경한다.

  • 바인딩:[ R t =[ R +[
  • 되돌릴 수 없는 구속력

실드 회귀 분석은 수용체 유형이 둘 이상인지 여부도 밝힐 수 있으며, 시스템이 평형에 도달하지 못했기 때문에 실험이 잘못됐는지를 보여줄 수 있다.null

Schild regression bindings.jpg

방사선과 바인딩 검사

첫 번째 무선 수신기 측정(RRA)은 1970년 레프코위츠 외 연구진에 의해 방사선과 같은 호르몬을 사용하여 수용기에 대한 결합 친화력을 측정했다.[1]null

무선 수신기 측정은 자유 리간드와 바운드를 분리해야 한다.이것은 여과, 원심분리 또는 투석을 통해 이루어진다.[2]null

분리가 필요하지 않은 방법은 H의 β-레이가 극히 짧은 거리를 이동한다는 사실에 의존하는 섬광 근접도 측정이다.수용체들은 폴리히드록시 섬광기로 코팅된 비드에 결합된다.바인딩된 리간드만 탐지할 수 있음.null

오늘날 형광법은 비용이 훨씬 저렴하고 위험성이 낮으며, 고투과 방식으로 반응을 다중화할 가능성이 있기 때문에 방사성 물질보다 선호되고 있다.한 가지 문제는 형광 라벨이 부착된 리간드가 리간드 결합을 방해할 수 있는 부피가 큰 불소포자를 지니고 있어야 한다는 것이다.따라서 사용된 불소포도어, 링커의 길이, 그리고 그 위치를 주의 깊게 선택해야 한다.null

리간드의 플루오포어가 수용체에 대해 상승된 항체의 플루오포어로 에너지를 전달하는 FET를 사용하는 것이 그 예다.null

표면 플라스몬 공명과 같은 다른 검출 방법에는 불소포도체가 필요하지 않다.null

참고 항목

참조

리간드 수용체 결합:케나킨 T, 1993.약물-수용자 상호작용의 약리학적 분석: 레이븐 프레스

  1. ^ Lefkowitz RJ; Roth J; Pastan I (November 1970). "Radioreceptor assay of adrenocorticotropic hormone: new approach to assay of polypeptide hormones in plasma". Science. 170 (3958): 633–5. doi:10.1126/science.170.3958.633. PMID 4319388. S2CID 41878471.
  2. ^ de Jong LA; Uges DR; Franke JP; Bischoff R (December 2005). "Receptor-ligand binding assays: technologies and applications". J. Chromatogr. B. 829 (1–2): 1–25. doi:10.1016/j.jchromb.2005.10.002. PMID 16253574.

외부 링크