플루오레스체인 디아세테이트 가수분해
Fluorescein diacetate hydrolysis | 이 글은 검증을 위해 인용구가 추가로 필요하다.– · · 책· · (2007년 1월)(이 템플릿 |
플루오레세인 디아세테이트(FDA) 가수분해 측정법은 표본 내 미생물의 효소 활성을 측정하는 데 사용될 수 있다. 밝은 황록색 빛이 생성되며 효소 활성도가 가장 클 때 가장 강하다. 이것은 분광기계를 사용하여 정량화할 수 있다.
적용들
FDA 가수분해효소는 종종 토양과 퇴비 샘플의 활동을 측정하는 데 사용된다. 그러나 에스테라제처럼 활동 단계가 낮은 미생물이 먼저 플루오레세인을 분리한다면 정확한 판독을 하지 못할 수 있다.
진핵 세포의 생존 가능성을 결정하기 위해 요오드화 프로피듐(proidium oodide, PI)과 결합하여 사용하기도 한다. 살아있는 세포는 비형광 FDA를 생존가능성의 표시인 녹색 형광 화합물 형광 투시체로 적극적으로 전환하고, 반면 막 합성 세포의 핵은 세포 사망의 표시인 붉은 형광 투시체를 만들 것이다. 현재 FDA/PI 체인은 생존성 점수가 70% 이상일 때 이식 적합성과 함께 인간 췌장 섬유의 생존성을 표준 평가한 것이다.
준비
FDA 스톡솔루션은 1ml 아세톤에 플루오르세신 디아세테이트 5mg을 용해하여 제조되며,[1] 활성 세포 생존성 테스트를 위해 수크로스를 첨가할 수 있다. FDA 얼룩은 반드시 4°C에서 어두운 곳에 보관해야 한다. 그렇지 않으면 상한다.[2]
참조
- ^ "VIABILITY TEST WITH FLUORESCEIN DIACETATE (FDA)". www.cabri.org.
- ^ Fontvieille, D.A.; Outaguerouine, A.; Thevenot, D.R. (1992). "Fluorescein diacetate hydrolysis as a measure of microbial activity in aquatic systems: Application to activated sludges" (PDF). Environmental Technology. 13 (6): 531–540. doi:10.1080/09593339209385181.
3. "Fluorescein diacetate hydroydrisis assay" http://www.eeescience.utoledo.edu/Faculty/Sigler/Von_Sigler/LEPR_Protocols_files/FDA%20assay.pdf
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